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荧光偏振法研究脉冲电场对酿酒酵母细胞膜流动性影响张鹰,曾新安’,温其标,李琳言1·咖电场处理后,酿酒酵母细胞膜的流动性显·‘咖虽然只能使少量的酵母致死,却能引281月光谱学与光谱分析华南理工大学轻工与食品学院,广东广州DPH(16--"135)(O25~,阅鹁平湍赶赴ち鞫杂跋臁>著减小,并且随电场强度和处理时间的增加而减小;通过平板计数法和紫外分光光度计法分别检测了脉冲5使酵母细胞膜的通透性显著增加,膜流动性显著降低。并且细胞的存活率随电场强度增大而减小,细胞膜的通透性随电场强度增大而增大。这表明细胞膜的流动性降低与细胞膜的通透性升高成正相关,与细胞的存活率成负相关。由此推测脉冲电场在对酿酒酵母灭菌过程中,细胞膜是其作用的一个关键位点,膜流动性减小,细胞膜通透性增强,是细胞死亡的主要原因。关键词荧光偏振法;脉冲电场;细胞膜流动性Q64A1000-0593(2008)01015605细胞膜是细胞生命活动的必需组织,其结构非常复杂,主要是由脂质和蛋白质两类物质组成的复杂超分子动态系统。年由和提出的液态镶嵌模型认为细胞膜是一种可以流动的嵌有蛋白质的脂类双分子层结构。膜流动性作为膜的一种生物物理学特性,与生物体的生命活[1]越来越受到人们的关注。(pulsedsterilization际是在特殊的处理室里对液态食品施加瞬时高强度的脉冲电场,将其中的微生物杀死的一种方法。近些年来脉冲电场在对果汁、牛乳等液态食品的非热灭菌研究中表现出12]层次机理研究及其应用研究相对较少。已有文献显示,细胞膜可能是脉冲电场作用的关键位点,但是目前关于脉冲电场处理对微生物致死作用与细胞膜理化特性的改变之间关系的PEFDPH采用荧光偏振法对脉冲电场处理下的酿酒酵母细胞膜的流动性进行了测定。并据此初步探讨了脉冲电场对酿酒酵母的致死作用与细胞膜及其流动性之间的关系。实验材料酿酒酵母菌种,华南理工大学微生物教研室提供;麦芽汁琼脂培养基,麦芽汁培养基为市购;磷酸盐缓冲溶液珼公司扔盟那膺秽涑tooLL-14PBs210_6~。,使用时稀释倍,℃下电导率为豐·~。实验装置脉冲电场连续处理系统,本研究室自行研制,最高输出422mL3O50·,,平行平板式电极,电极材料为铜,绝缘材料为聚四氟乙烯,脉冲驱动电路波形为方波。F-4500Sigma离心TU-1810菌液准备从酿酒酵母斜面上挑取三环菌种接种于麦芽汁培养基中,于℃在摇床中培养螅rpm10弃上清液,将酿酒酵母沉淀稀释于倍的生理盐水中,在MPa10min甆。January2008·min2006-092820061229基金项目:国家自然科学基金重点项目和广东省自然科学基金资助作者简介:张鹰,年生,×009n'Lrn
万方数据
而/=vv--GvHuqv瓦雨耳2H1光谱学与光谱分析脉冲电场灭菌后存活对数检测使用平板计数法,取处理前后的酿酒酵母菌样经%NaCI1于培养皿中,倒入麦芽汁琼脂培养基,在℃培养h3酿酒酵母细胞核内蛋白质和核酸溢出含量的检测260280iraD3]4rpmmin260280下通过测定核酸和蛋白质的吸光值的变化可以确定核酸与蛋白质含量的相对变化。测试中以无菌蒸馏水作为参比溶液。荧光探剂标记茵体细胞膜取经脉冲电场处理前后的酿酒酵母样品r