文档介绍：农业微生物实验课指导(修订版)。通过对杲础培养杲的配置,掌握配置培养杲的一般方法和步骤。实验原理马铃薯葡萄糖琼脂培养基是一种半合成培养基,适宜于培养各种类型微牛物,尤其适合培养真菌。这种培养基是由天然材料马铃薯和葡萄糖组成的,营养丰富而且原料容易取得,是一种使用而价廉的培养基。马铃薯浸出粉有助于各种微牛物的牛长,葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂。牛肉浸膏培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌培养基,有吋乂称普通培养基,由于这种培养基屮含有一般细菌牛长所需的最基本营养物质,所以可供作微牛物牛长繁殖Z用。基础培养基屮含有牛肉膏,蛋白豚和NaCl。其屮,牛肉膏作为微牛物碳源,能源,磷酸盐和维牛素,蛋白豚提供氮源和维牛素,而NaCl提供无机盐。在配置牛肉浸膏培养基时还需要加入一定量的琼脂作为凝固剂。高氏一号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加入适量的抗菌药物,则可用来分离各种放线菌。此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐,这些无机盐可能相互作用而产牛沉淀。因此,混合培养基成分时,一般是按配方的顺序依次溶解各成分,甚至有吋还需要将两种或多种成分分别灭菌,使用吋再按比例混合。三・实验准备实验材料:牛肉浸膏、蛋白瞅NaCl、琼脂、NaOH溶液、HC1(酸液)、葡萄糖、马铃薯(土豆)、酒精、可溶性淀粉2g、、,MgSO4-、>FeSO4-(母液)、琼脂2g、自来水lOOmL等。实验器材:高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、电炉、天平、三角瓶、纱布、线绳、记号笔、超净工作台、pH计、玻璃棒、量筒,烧杯和三角瓶等。(l)PDA培养基:马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即PotatoDextroseAgar。1、 配方:马铃薯(去皮)200g、蔗糖15-20g>琼脂20-30g>蒸懈水1000mL。PH自然。2、 步骤:⑴将马铃薯洗净,去皮,切成大小约为1・3cm的小块,称200g,放入1000mL水屮煮沸20-30min,用四层纱布过滤,取其滤液;定容:加水补足至1000mL;加入称量好的蔗糖和琼脂至全部溶化;趁热分装至试管或三角瓶;用封口膜封口,扎紧,即可进行灭菌;灭菌:,121°C,高压蒸汽灭菌20min,冷却后将培养基取出;—•般在培养基温度降至50-60摄氏度的吋候开始在超净工作台上往培养皿屮分装;待培养皿屮的培养基凝固后,将培养皿倒置,防止皿盖丄的冷凝水污染培养基(此时皿盖在下,培养基屮蒸发出的水蒸气是向上走的,还是凝结于培养基上,就不会有在皿盖上形成水滴后再滴落的情况了,如此可防止污染)。牛肉膏蛋口腺琼脂培养基1、 配方:牛肉膏3-5g>蛋白月东10g、***化钠5g、琼脂20-30g>蒸啊水1000mL。・。2、 步骤:称量:根据用量按比例依次称取各种成分,牛肉膏常用玻璃棒挑取,放在小烧杯或表面皿屮称量,用热水融化后到入烧杯,蛋白腺易吸湿,称量时要迅速。溶解:在烧杯屮加入少于所需的水量,加热,逐一加入各成分,使其溶解,琼脂在溶液煮沸后加入,融化过程需不断搅拌。加热时应注意火力,勿使培养基烧焦或溢出。溶好后,补足所需水分。调pH值:若pH值不适宜,可用1mol/LNaOH或1mol/LHCI把pH值调至所需范围。过滤:趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察,如无特殊耍求时可省去此步骤。分装:按照实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角瓶内;分装高度以试管高度的1/4左右为宜,分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。以下步骤同上(5)-(8)高氏培养基:高氏培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。1•配方可溶性淀粉(20g)、KNO3(1g)>K2HPO4()>MgSO4-7H2O()>NaCl()>FeSO4-7H20()>琼脂20g、pH=-、步骤:配制吋,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水屮,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到100mL,调pH,121°C灭菌20min。高温灭菌后,倒平皿前加入10%酚2滴至100mL培养1111屮混匀,将培养基倒入平皿内约15mL/皿。实验二环境中微生物的分离和培养一、 实验目的1、 消毒和灭菌的操作方法及原理。2、 证明实验室环境与体表存在微牛物。3、 学****空气、土壤、实验室屮微牛物分离的方法。4、 观察不同类群微牛物的菌落形态特征。二、 实验原理微牛物在自然界屮呈混杂状态存在,要获得