文档介绍：分类号!密级——.调控血管平滑肌细胞向成骨样细胞分化的功能研究博士学位论文作者姓名:李师君学科专业:儿科学学院怠⑺:指导教师:毛定安教授论文答辩日期到湘雅二医院中南大学二。一二年五月答辩委员会主
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原创性声明㈣作者签名:互堂三际η┟:一日期:墨坚年—￡月—日期:。晟显律先学位论文版权使用授权书作者签名:奎唑垂本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特篒以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。
第一部分跋煅9芷交∠赴虺晒茄赴分化的研究中文摘要目的:研究谛∈笱9芷交∠赴虺骨样细胞分化中的作用。方法:用庖哂〖7ḿ觳鈓谛∈笮脑唷⒐趋肌、血管平滑肌细胞、胸主动脉中的表达情况。用桓视土姿崮,盏佳9芷交∠赴虺晒茄赴分化,免疫印迹法检测谡庖还讨械谋泶锼的改变。观察成骨样细胞分化指标变化:碱性磷酸酶珹钚杂梅止夤舛燃萍觳舛韵趸椒邮头呕竦茫钙素,梅派涿庖卟舛ǚú舛ǎ赴缢睾烊色后,用氯化十六烷基嘧啶提取染色茜素红量化矿化结节染色。庖哂〖7ê褪凳倍縋分别检测鞍缀蚼表达量的变化。根据前体序列设计引物,退火后连接至一载体,构建的表达载体甿=玴H局裂9芷交∠赴斐过表达细胞模型,随后予瓽盏挤只椒检测钚浴置谝约跋赴锌蠡峤诹康谋浠琑蛋白用庖哂〖7ḿ觳猓琑表达用免疫印迹法和实时定量觳狻结果:一在心脏及骨骼肌组织中有较高水平的表达,博士学位论文
活性和骨泌素的分泌量及矿化结节的生成随着的过表达而而在托刂鞫鲋猩倭勘泶铩与对照组相比,视土酸钠诱导的血管平滑肌细胞向成骨样细胞分化过程中,钚约分泌水平均明显增加,鞍妆泶锼较灾撸铱蠡节形成也明显增多。胱H玖丝罩柿5腣相比,转染了甿腣中的表达水平显著增加,明显下降。的过表达抑制了鞍椎谋泶铮鳵的表达水平却未受影响。结论:用质粒构建成功表达载体,转染该载体可以使在血管平滑肌细胞内稳定地高表达。过表达抑制血管平滑肌细胞向成骨样细胞分化。关键词:血管平滑细胞,成骨样细胞,,
第二部分调控血管平滑/±虺晒茄赴只的机制研究目的:预测并验证作用的靶基因,为防治动脉钙化提供理论依据。方法:用多个靶基因预测软件分析得到作用的靶基因。┰霭形坏阍谀诘陌谢琍扩增靶基因全长,,以此为模板,用约盒靶基因疷中引入三个碱基突变,构建突变型靶基因表达载体,这两个载体分别与或餐H荆加盏挤只鄄彀谢虻鞍妆泶铮谢虻鞍妆泶镉肳免疫印迹法检测。结果:砑げ釸为作用的靶基因。H入含突变型结合位点的载体可以消除对鞍妆泶锏囊种疲崾驹谙虺晒窍赴只墓讨校琑是匾5淖饔冒械恪结论:基因是陌谢颉只有与’贝嬖谇艺J保琺拍苡隦的岷希訰蛋白的产生发挥反向调节作用。关键词:靶基因,琺靥中文摘要—博士学位论文
,,Ⅱ,,猰博士学位论文
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