文档介绍：齐鲁药事· . : · ·
一缬氨酸生产菌的选育及发酵条件的优化
赵丽丽,刘忠
鲁南制药集团股份有限公司,山东临沂
摘要:目的研究~ 缬氨酸生产茵的选育及发酵条件的优化。方法以黄色短杆菌为出发菌株,经紫外线、硫
酸二乙酯逐级诱变处理,在含磺胺胍、~氨基丁酸—、一噻唑丙氨酸一结构类似物平板上定向筛选,通过
响应面分析对培养基的组成进行优化,同时对发酵条件如温度、值等进行了探索。结果获得一缬氨酸高产菌株
,优化了发酵条件。结论在最优条件下发酵,可产一缬氨酸.· 。。
关键词:~ 缬氨酸诱变育种条件优化
中图分类号:. 文献标识码: 文章编号:———
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一缬氨酸作为分支链氨基酸之一,系人体必须氨基酸, /,/,琼脂粉.,.~..压力
具有多种生理功能,主要用以配制复合氨基酸输液、合成多肽下灭菌。
药物和食品抗氧化剂等。近年来,人们发现一缬氨酸是合..种子培养基· :葡萄糖,玉米浆,酵母膏
成免疫抗生素的重要中间体,其年消耗量猛增。关于一缬,尿素, ,.,.,.,
氨酸的生产在国内外已有些报道,如、—/ · ~ ,生物素/ · 。,.~ .,
、中科院微生物研究所以及沈阳药科大学。。
道的有关发酵法生产一缬氨酸的研究。我们以黄色短杆菌..发酵培养基· :葡萄糖,玉米浆,
为出发菌株,经过紫外线、硫酸二乙酯逐级诱变处理, ,, ., .,
定向育种获得一株一缬氨酸高产菌一一.,.,.,/ · 。,生物素/·
,并首次用响应面分析法对发酵培养基组。,.~.,.压力下灭菌。
成进行了优化,在最优条件下发酵,。
达.· 。,较未优化前产量有大幅度提高。.采用分析方法
材料与方法..:采用酸度计测定。
.出发菌株黄色短杆菌..菌体生长;吸取样品菌液.,用蒸馏水稀释
,鲁南制药集团保存菌株。倍,摇匀后测定值。
.培养基..还原糖:采用一多功能谷氨酸一葡萄糖分析仪
..完全培养基· :葡萄糖,蛋白胨,牛肉膏测定。
,酵母膏,.,琼脂条,.~ .,. ..~缬氨酸:采用纸上层析法、比色定量法和高效液相
压力下灭菌。色谱法测定。
.. 基本培养基· :葡萄糖,硫酸铵, 结果与讨论
,.,.,.,
· · 齐鲁药事.,.
为出发菌株,采用紫外线和诱变处理,根据代著,其中因素之间的交互作用也较大。
谢控制发酵原理,依次赋予其一、一、、—、一获得的响应面立体图如图~ 所示,响应面规范分析
等遗传标记,最后获得一株~ 缬氨酸高产菌结果如表所示。
,其诱变谱系见图。
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菌株【厂缬氨酸产量·
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黄色短杆菌.
紫外线
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紫外线
’. 图—,响应面立体图
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图一缬氨酸生产菌的选育谱系;
.发酵培养基组成的优化响应面分析是及其合作
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