文档介绍：选修3知识点复****专题1 基因工程一、基因工程的概念基因工程又叫或。原理是 ,操作水平是水平。优点: ; 地改造生物的遗传性状。二、基因工程的基本工具“分子手术刀”——(1)来源:主要从中分离纯化出来。(2)功能:使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开(3)特点具有性。 (4)结果:产生: 和。“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和 T4-DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合。②区别:E·coliDNA连接酶只能连接末端;T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效较。(2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将加到已有的脱氧核苷酸片段的末端, 形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——(1)载体具备的条件:①能够稳定保存并 ;②有一至多个酶切位点③含有 ,便于筛选。④对受体细胞无害。(2)最常用的载体是 ,化学本质是。(3)其它载体:三、基因工程的基本操作程序(一)▲获取目的基因1、从基因文库中获取目的基因2、利用PCR(是的缩写)技术扩增目的基因PCR技术与DNA复制比较:相同点:原理、原料。PCR技术 DNA复制不解旋方式加热 DNA解旋酶同场所体外活细胞中点酶热稳定DNA聚合酶 DNA聚合酶等(2)过程:第一步:加热至90~95℃,DNA,不需要解旋酶;第二步:冷却到55~60℃,结合到互补DNA链。变性和复性利用了DNA的热变性原理;第三步:加热至70~75℃,从引物起始互补链的合成。3、化学方法直接人工合成目的基因。适用范围:基因比较,又已知。(二)▲基因表达载体的构建——基因工程的核心1、基因表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中,并可以给下一代,同时使目的基因能够和发挥作用。2、基因表达载体的组成:①(首端),是_________的识别位点;②(尾端);③标记基因(常用的标记基因是)用于筛选含目的基因的细胞;④目的基因。(三)▲将目的基因导入受体细胞将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是,其次还有和等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是。此方法的受体细胞多是。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是最常用的原核细胞是,其转化方法是:先用处理细胞,使其成为,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。(四)▲目的基因的检测与鉴定1、分子水平检测对象检测技术1 DNA12 mRNA3 蛋白质DNA分子杂交技术和分子杂交技术均需要用用放射性同位素等标记的作探针,观察是否有杂交带。2、个体生物学水平的鉴定 :如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。四、基因工程的应用1、植物基因工程: 抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。2、动物基因工程: 提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。 ▲附:乳腺生物反应器—— 药用蛋白基因﹢_____________________→________导入哺乳动物 _______→早期胚胎→性别鉴定→ __________→雌性动物进入泌乳期在乳腺细胞中特异性表达)。3、基因工程药物:将目的基因导入微生物,制成 ,生产药物4、基因治疗:把正常基因导入病人