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神经系统生理实验讲义.doc

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文档介绍

文档介绍:一、坐骨神经- 腓肠肌标本制作实验目的 1 、熟悉并掌握蟾蜍或蛙坐骨神经- 腓肠肌标本的制作方法。 2 、熟悉并掌握生理学实验常用器械的使用和基本操作技术。实验原理坐骨神经和腓肠肌属于可兴奋组织, 给坐骨神经一个适宜的刺激可产生一可传导的动作电位,引起其所支配肌肉(腓肠肌)的收缩。将蟾蜍或青蛙的坐骨神经- 腓肠肌标本置于任氏液中,其活性可以在几个小时内保持不变。故制备蟾蜍或青蛙的坐骨神经- 腓肠肌标本, 可用于研究观察组织的兴奋和兴奋性、传导性以及刺激与肌肉收缩等基本生理现象和过程。故制备坐骨神经- 腓肠肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技能。实验对象蟾蜍或蛙。蟾蜍和青蛙是两栖类动物, 两栖动物一些基本生命活动和生理机能与温血动物相似, 而其离体组织、器官保持活性所需条件比较简单, 易于控制和掌握, 所以生理实验中常选用蟾蜍或青蛙的离体组织或器官作为实验标本。实验器材和药品蛙类手术器材一套[ 蛙板、固定钉、粗剪刀、手术剪、眼科剪、眼科镊、刺蛙针1根、玻璃分针2根、锌铜弓] ;滴管、培养皿( 120mm ) 、烧杯( 250ml ) 、废物盘、任氏液实验步骤 1 、破坏脑脊髓取蟾蜍一只, 自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍, 食指按压吻端, 拇指按压背部, 使其头部尽量前俯。右手持刺蛙针从相当于枕骨大孔处( 用刺蛙针从两眼中间开始沿着脊柱方向下划, 触到凹陷处既是枕骨大孔处, 它位于蛙的颅骨和脊柱中间) 垂直刺入, 然后向前通过枕骨大孔刺入颅腔,左右搅动充分捣毁脑组织。接着将刺蛙针抽回至进针处(即枕骨大孔处, 注意勿全部拔出刺蛙针) ,再向后刺入锥管,反复提插捣毁脊髓。此时如蟾蜍四肢松软,呼吸消失,表明脑和脊髓已被完全损坏,否则应按上法重复进行。 2 、剪除躯干上部及内脏左手提住蟾蜍脊柱, 右手持粗剪刀在骶髂关节水平面(第4 腰椎平面) 以上 ~ cm 处剪断脊柱。左手握住蟾蜍的后肢, 用拇指压住骶骨, 使蟾蜍头与内脏自然下垂, 右手持粗剪刀, 沿着脊柱两侧剪除内脏几头胸部, 留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴在脊柱两侧的坐骨神经。剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。 3 、剥皮左手捏住脊柱断端(注意不要触及坐骨神经) ,右手捏住皮肤边缘,用力向下剥掉去除全部后肢的皮肤。把去除了皮肤的标本放在盛有任氏液的培养皿中。将已使用过的剪刀、镊子、蛙板等手术器械洗净。再进行下面步骤。 4 、分离两腿,制作坐骨神经- 腓肠肌标本 分离两腿用镊子夹住脊柱将标本提起, 背面朝上, 两腿下垂, 剪去向上突起的尾骨( 注意勿损伤坐骨神经) 。然后沿正中线用粗剪刀从脊柱和耻骨联合中央处剪开,分离两腿。将分离的两条腿仍浸于盛有任氏液的培养皿中。 游离坐骨神经取一腿置于蛙板上的玻璃板上。将标本腹面朝上放置, 用固定针将标本固定, 使其尽量展开。用玻璃针沿脊柱旁向下游离坐骨神经, 用玻璃分针沿坐骨神经沟纵向分离暴露坐骨神经,将神经一直游离至腘窝,用眼科剪剪去其游离的分支。 制备坐骨神经小腿标本将游离干净的坐骨神经从脊柱根部剪断(需连有 2~3 节脊椎骨) ,将其搭于腓肠肌上, 从膝关节周围剪掉大腿肌肉, 并用粗剪刀将其股骨刮干净, 然后再股骨下 1/3 处剪断, 完成就是坐骨神经- 小腿标本的制备。 制备神经- 腓肠肌标本将上述坐骨神经- 小腿标本在腓