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唾液淀粉酶生化实验.docx

文档介绍

文档介绍:1 唾液淀粉酶最适 pH 值的测定实验小组成员: 孙天纬李敏媛唐芳娇蒋雅莉实验目的: ,并完成设计报告。 pH的测定原理和方法。 。实验原理: ,如温度、 pH、激活剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响,可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉反应的颜色随产物的量的增加而加深的特点,来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色,颜色由蓝变黄,表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。 2. 进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时,淀粉遇碘呈蓝色, 经查阅文献, 吸收波长位于 660nm 处。不同 pH 环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同,吸光度值也不同。因此,通过测量 660nm 处的吸光度值,可以了解 pH对酶促反应的影响,吸光度最小的溶液其 pH 即为唾液淀粉酶的最适 pH。 2 实验步骤: 1. 缓冲溶液的配制。取7支试管进行编号 1-7, 分别按下表加入试剂, 再加蒸馏水稀释到 10mL 。编号 123456789 pH Na 2 HPO 4 (ml ) NaH 2 PO 4 (ml ) 2. 淀粉用量的确定用量: mL 12345 空白 / L的淀粉 ——稀释 10倍的唾液 37℃水浴 分钟,然后每管滴加 2滴碘液 H 结论:加入 的淀粉溶液的试管颜色最浅*选择颜色最浅的一支试管 3 .唾液的采集。先给备取者一杯纯净水让其漱口,将漱口液吐掉,让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口,并做咀嚼运动,这时,备取者的唾液会不停地流出来。 3 。取7支试管,进行编号 1 '-7',进行稀释。稀释倍数05 10 15 20 25 30 唾液体积( ml) 蒸馏水(ml)0 5. 唾液稀释倍数的选取。另取 7支试管,分别编上 A-G号,各取上述稀释的唾液各 ml, 分别加入相应编号的试管里,向 7 支试管内同