文档介绍：第一章病毒
第一节概述
一、病毒的发现和研究历史
1886年,A. Mayer 发现具有传染性的烟草花叶病;
1892年,D. Ivanovsky烟草花叶病病原体能通过细菌滤器:
一种能通过细菌滤器的”细菌毒素”或极小的细菌
1898年,M W Beijerinck对烟草花叶病病原体的研究结果:
能通过细菌滤器;
可被乙醇沉淀而不失去其感染性,
能在琼脂凝胶中扩散;
用培养细菌的方法不能被培养出来,推测只能在活细胞中生活;
比细菌小的具有传染性的活的流质
1900年前后,包括口蹄疫(foot and mouth disease)在内的
多种动植物疾病病原体的滤过性特性被证明。
filterable viruses(滤过性病毒)
viruses(病毒)
F W Twort(1915年)、F d’Herelle(1917年),分别发现
细菌(Shigella dysenteriae)病毒
bacteriophages
Phago:“to eat”
噬菌体(phage)
1935年,W M Stanley首次提纯并结晶了烟草花叶病毒;
Bawden等证明烟草花叶病毒的本质为核蛋白;
1940年,Kausche首先用电镜观察到烟草花叶病毒颗粒;
二、病毒的特点和定义
1、特点
1)不具有细胞结构,具有一般化学大分子的特征。
2)一种病毒的毒粒内只含有一种核酸,DNA或者RNA。
3)大部分病毒没有酶或酶系极不完全,不含催化能量代谢
的酶,不能进行独立的代谢作用。
4)严格的活细胞内寄生,没有自身的核糖体,没有个体生
长,也不进行二均分裂,必须依赖宿主细胞进行自身的
核酸复制,形成子代。
5)个体微小,在电子显微镜下才能看见。
6)对大多数抗生素不敏感,对干扰素敏感。
表2-1 单细胞微生物与病毒性质的比较
a DNA病毒和RNA病毒中的一部分;b 利福平可抑制痘病毒复制
2、定义
迄今仍无一个科学而严谨的定义
病毒为具有独立于其宿主的进化史的绝对细胞内寄生物,它的DNA
或RNA基因组被其所编码的蛋白质壳体化(encapsidation)。
-------------(Fields等,1990年)
非细胞生物
(真)病毒:至少含核酸和蛋白质二种组分
亚病毒
类病毒:只含具侵染性的RNA组分
卫星RNA:只含有不具侵染性的RNA组分
朊病毒:只含蛋白质
三、病毒的培养和纯化
同微生物学其他学科分支一样,病毒学的进步完全得益于
研究方法和技术手段的发展。
通过病毒的分离与纯化获得纯化的、有感染性的病毒制备物
是病毒学研究和实践的基本技术。
病毒的培养:二元培养物法
噬菌体
细菌培养物
培养液
营养琼脂平板
细菌培养液变清亮
细菌平板成为残迹平板
若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板,经过一定时间培养,在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域,即噬斑
动物病毒
实验动物
鸡胚
多种细胞培养
四、病毒的培养和纯化
(参见P161)
1、病毒的培养
若标本经过适当稀释进行接种并辅以染色处理,病毒可在培养的细胞单层上形成肉眼可见的局部病损区域,即蚀斑或称空斑。
大多数动物病毒感染敏感细培养能引起其显微表现的改变,即产生致细胞病变效应
(cytopathiceffect,CPE),例如细胞聚集成团、肿大、圆缩、脱落,细胞融合形成多核细胞,细胞内出现包涵体(inclusionbody),乃至细胞裂解等。