文档介绍：液相色谱仪日常维护及常见故障分析主讲:赵广义1流动相2脱气机(在线)3泵(单元、二元、四元)4进样器(手动、自动)5色谱柱6检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)一、液相色谱仪日常维护及注意事项所用溶剂应为HPLC级,水应为二次超纯水;所用溶剂应经过过滤。过滤水应使用水相滤膜,过滤有机相应使用有机相滤膜,不能混用,也不要用错。每一张滤膜只能用一次,不能重复使用。如果没有在线脱气机,所用溶剂应经过超声脱气。水易滋生藻类,避免直接照射,过滤后的水最好使用不要超过两天。-。注意溶剂的相容性,避免使用不相容的溶剂。避免使用强酸、强碱或有机***等腐蚀性溶剂。在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞,必要时小心拿下用强酸(35%***)浸泡1小时,用水冲洗,但不要使用超声处理。1流动相名称乙酸***乙睛苯丁醇四***化碳***仿环己烷环戊烷二***乙烷二***甲烷二***甲酰***二***亚砜二氧六乙酸乙酯乙醇***庚烷正己烷甲醇甲乙***1-辛烷戊烷1-hylacetateEthylAlcoholDi-EthyletherHeptaneHexaneMethylAlcoholMEKI-OctanePentaneI-PropylAlcoholDi-richloroethaneWaterXylene三***甲烷水二甲苯2-丙醚ImmiscibleMiscible溶剂的相溶性溶剂信息避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂:卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。高浓度的无机酸例如:***和硫酸。能够形成卤素自由基或酸的***化试剂及其混合物。含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。在有机溶剂中的有机酸溶液。含有强络合剂的溶液。四***化碳和异丙醇或THF混合液。溶剂截止波长溶剂UV截止波长(nm)乙睛190水190环己烷195己烷200甲醇210乙醇210***220二***甲烷220***仿240四***化碳265四氢呋喃280(220)甲苯285所以在使用紫外检测器时,所用波长应至少比所用溶剂的截止波长大20nm以上。在使用紫外检测器时,所用波长与所用溶剂的截止波长接近(或低于截止波长)时,容易产生噪音干扰,从而影响检测结果。生色团和最大吸收波长生色团分子式实例最大吸收波长(nm)羰基(***)RR‘C=O***271羰基醛RHC=O乙醛293羧基RCOOH醋酸271酰***RCONH2乙酰***208次乙基RCH=CHR乙烯193亚次乙基RC=CR乙炔173睛RC=N乙睛<160硝基RNO2硝基甲烷271溶剂、PH、温度等都会影响生色团的最大吸收峰的强度和位置。溶剂过滤不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器,降低泵的操作性能。遵从下列建议可以提高性能,延长溶剂过滤器的寿命:使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。用滤膜过滤溶剂去除微生物。每两天更换或过滤溶剂。避免溶剂瓶直接日照。-。选择合适的滤膜聚四***乙烯滤膜:适用于所有溶剂,酸和盐,并无任何可溶物。醋酸纤维滤膜:适用于水基溶剂,不适用于有机溶剂,推荐用于蛋白质和其相关的样品。尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可用于强酸、70%乙醇、二***甲烷、不适用于DMF二***甲酰***。再生纤维素滤膜:具有蛋白质吸收低,同样适用于水溶性样品和有机溶剂。注意:1,每张滤膜只能用一次。2,水相和有机相不要搞混。柱塞清洗附件SealWashHPLC使用缓冲溶液Buffer时,由于缓冲盐溶液存在高压盐析现象,析出的细小盐粒会损伤蓝宝石柱塞杆和密封垫,从而造成漏液等故障现象,因而建议选配柱塞清洗附件SealWash。,强烈建议选配在线的柱塞清洗附件SealWash。清洗液配置:90%水+10%异丙醇溶液,流速为2-3滴/min。该混合液可抑制菌类生长和降低水的表面张力。清洗液虹吸流出,不能干涸。