文档介绍：第二军医大学
博士学位论文
TIP30通过OPN调控喉鳞状细胞癌增殖及转移的研究
姓名:陈剑秋
申请学位级别:博士
专业:耳鼻咽喉科学
指导教师:郑宏良
2011-05
TIP30 通过 OPN 调控喉鳞状细胞癌增殖及转移的研究
摘要
喉癌发病率在头颈部恶性肿瘤中占第二位,是较常见的恶性肿瘤之一。随着环境
污染,发病率有增高趋势。肿瘤术后局部复发和侵袭转移是死亡的主要原因,故寻找
高灵敏性,高特异性的肿瘤标记物,深入研究喉癌的侵袭、转移等机制,监测喉癌的
发生发展及预后,具有重要的临床应用价值。
TIP30 3,是一种新发现的肿瘤抑制基因。近年来的研究表明,TIP30 在
多种正常组织中表达,在黑色素瘤、肺癌、恶性胶质细胞瘤、乳腺癌、结肠癌和肝细
胞癌等多种肿瘤中表达下调。研究 TIP30 抑制转移机制发现,TIP30 具有抑制肿瘤细
胞增殖和侵袭转移能力,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成等作用。这种抑癌机
制可以通过 P53 的大量表达引起 Bad 和 Bax 等的大量表达,进而抑制致癌基因
Bcl-2/Bcl-Xl 蛋白水平的表达;TIP30 基因可通过下调人脐血管内皮细胞(HUVEC)
和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)转录来导致肿瘤血管形
成减少,从而降低了肿瘤转移;TIP30 与抗癌药物联合应用可以产生叠加效应,加强
抑癌效果;另外,TIP30 蛋白可与 Karyopherin/ Importinβ家族成员及核孔蛋白相结合,
抑制蛋白输入核内,也可能是抑癌的一个原因。最近有研究显示,肝癌中高表达 TIP30
通过与 ETSI 相互作用,抑制 ETS1 与 AP-1 对骨桥蛋白(oesteopontin, OPN)转录激活
的协同作用,从而降低 OPN 的表达,进而抑制肝癌的转移。而 OPN 是一种肿瘤转移
相关基因,可以加速细胞外基质降解和肿瘤血管形成,提高肿瘤细胞侵袭和转移能力。
在肝癌和肺癌研究中,已证实 TIP30 对肿瘤转移相关基因 OPN 的表达具有负性调控
作用。
但目前尚未见 TIP30 在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理学指标的相
关性报道,以及 TIP30 在喉癌中与 OPN 是否具有相关性和 TIP30 能否抑制喉恶性肿
瘤侵袭转移、降低 OPN、VEGF 和 MMP-9 等肿瘤转移相关基因的表达,其可能机制
也尚不清楚。因此本实验利用免疫组织化学,探讨喉癌组织中 TIP30 与 OPN 表达及
其相关性,以及 TIP30 表达水平对喉癌复发、转移和患者生存等的影响,评价 TIP30
作为喉癌预后指标的价值。并对 TIP30 的生物学功能在人类喉癌细胞系和裸鼠体内进
行了进一步验证,探讨 TIP30 抑制肿瘤侵袭转移的可能分子机制,以期为喉癌的早期
诊断、预后判定及治疗提供新的策略和理论依据。本研究共分为四个部分:
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第二军医大学博士学位论文
第一部分 TIP30 和 OPN 基因在喉癌组织中的表达及其临床意义。目的:研
究人喉鳞状细胞癌()组织中 TIP30 和 OPN 的表达,及其 TIP30 与临床病理
学特征、预后的关系,分析 TIP30 与 OPN、P53 表达的相关性。方法:对 105 例喉
鳞状细胞癌及癌旁组织手术切除石蜡标本,采用免疫组织化学 SP,检测 TIP30 和 OPN
的表达并进行相关性分析;结合喉癌患者的临床病理学特征进行 TIP30 蛋白表达分
析;通过生存分析评价 TIP30 作为喉癌转移或预后指标的价值。结果:TIP30 在喉
鳞癌组织中呈低水平的表达,和癌旁相对正常组织比较差异有统计学意义(P﹤)。
TIP30 和 P53 的蛋白表达呈负相关(P=-),与 OPN 在蛋白水平上具有负相关性
(P=)。TIP30 的表达与性别、年龄、原发部位无相关性,与临床分期、病理组织
学分级和颈部淋巴结转移有关。高分化及 I-II 期喉癌组织中 TIP30 的表达高,低分化
及 III-IV 期喉癌组织中其表达降低(P= / P= ),在淋巴结转移的喉癌组织
中 TIP30 蛋白表达明显高于无转移组( P=)。TIP30 表达降低与患者的复发率呈
负相关(P= ),与患者生存时间呈正相关(P=)。结论:TIP30 的表达水平
和患者的存活时间密切相关,TIP30 可能在喉鳞癌发生发展和转移、复发中起到重要
的作用,可作为肿瘤标志物用于临床诊断和预后判断。
第二部分 TIP30抑