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学位论文作者亲毫签名:塑日期:塑避塑宣学位论文作者亲笔签名:麴茧论文使用授权的说明独创性声明料。与我一同对本研究做出贡献的向志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有严保密,在——年后解密可适用本授权书。口表或撰写过的研究成果,也不包含在浙江农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使用过的材本人声明,所呈交的学位论文,在指导教师指导下,通过我的努力取得的成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发重侵犯他人知识产权的行为,由本人承担应有的责任。本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定,即学校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。。朐诜娇蚰诖颉啊獭指导教师亲笔签名:目
摘要化学农药在防治农业有害生物方面的应用效果显著,但是由于化学农药的过量使用,环境问题也随之产生。生物农药以其独显的高效低毒的特点,将在农业病虫害防果。挖掘我国丰富的资源,筛选出更多具有杀虫活性的茵,分离克隆其编码杀虫蛋白的基因,对构建工程菌,培育转的抗虫植物具有深远的意义。松材线虫是一种林业有害生物,对松树具有毁灭性的危害,它通过松墨天牛进行传播,松树一旦感染上松材线虫,将在很短的时间内死亡。目前,对松材线虫的防治进行防治难度较大,国内外研究的较少。本实验室从环境中分离出株苏云金芽孢杆菌,初步筛选出甓运刹南叱婢哂卸旧弊饔玫木辏徊教崛≌株菌株的伴孢晶已经知道对松材线虫具有毒杀活性的是菌株编码产生的伴孢晶体蛋白,的引物,以菌株质粒D0褰蠵扩展,扩增出一段保守区域序,对基因进行克隆,克隆产物送出测序,测序结果分析该菌株含有基因,设长基因进行克隆,得到我们需要的遗产材料。关键词:苏云金芽孢杆菌,松材线虫,伴孢晶体蛋白,治中得到越来越广泛的应用。苏云金芽孢杆菌制剂是目前研究最为深入,应用最为广泛的生物农药。其产物的结晶伴胞晶体蛋白对磷翅目、半翅目昆虫具有特异的毒杀效主要是针对其媒介昆虫松墨天牛来进行的,主要以化学防治为主,直接针对松材线虫体蛋白,.对松材线虫进行毒力测定,最后筛选出一株对松材线虫具有最强毒杀活性的菌株,命名为菌株。为了能为培育出抗松材线虫病的松树树种提供遗产材料,本实验室将克隆出菌株中能编码产生的伴孢晶体蛋白颉Mü樵奈南祝杓对虮J厍计基因的特异性引物,┰龅玫絚虻娜ǔせ颍詂虻娜:
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致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯具有杀松材线虫活性的苏云金芽孢杆菌虻目寺