文档介绍：大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T6U/L-250U/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平。用纯化的大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入MMP-2,再与HRP标记的MMP-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480U/L)×1瓶3酶标包被板12孔××1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。:检测细胞内的成份时,用PBS(-)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。240U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液120U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液60U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液30U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液15U/L1号标准品150