文档介绍：中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文第一部分 【摘要】目的优化弱阳离子交换磁珠()联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱()建立尿液多肽谱的实验方法,建立代谢综合征(Ms)早期肾损害尿液多肽谱。方法(1)探讨尿液采集方式、溶解温度、 pH值、样本上样量、样品靶和质谱数据采集方式对磁珠联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱()建立尿液多肽谱的影响,评估实验方法的重复性;(2)尿液样本来源于2008~2009年北京平谷地区“代谢综合征肾脏损害"流行病学研究。崦涨国国家胆固醇教育讦划的***治疗专家组 III(ATPIII)诊断标准,MS患者20“g/mill≤尿白蛋白排泄率(UAE)Q00“咖in 和估算肾小球滤过率(eGFR)≥60ml/。入选者分为健康对照(组I)、MS合并正常白蛋白尿组(组II)和MS合并微量白蛋白尿组(组III)。 DI。。结果(1):收集过夜段尿标本、常温溶解、上样量30灿、点靶P01ished steeltarget及手动模式采集数据;%~%,%~%。(2)165例入选者中组I 65例、组Ⅱ54例、组III 46例,采用优化的 。结论本实验建立了灵敏度较高、—,适合高通量的临床蛋白质组学研究。应用该技术建立了正常人、Ms合并正常白蛋白尿及Ms合并微量白蛋白尿的尿液多肽谱。’.,■. 【关键词l伎谢综合症;乞肾脏损害:尿液多肽谱:磁珠分离联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 4 中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文 Part I optimization ofpeptidome anaIysis by ic bead—based matrix-assisted laser desorption/ionization time—of.-flight mass spectrometry method and establishment ofurine peptidome profiling ofmetabolic syndrome patients withearlyrenalinj ury 【Abst阳ctl Obj ectiVe T0 optiIIlize me peptidome aIlalysis of ma印etic bcad-b嬲ed weak cation exchange cl啪mato铲aphy(MB—WCX) baSed m撕x— desorptioⅣiomzation痂ne—of-night maSs spec句rometry (MALDI-TOF-MS)method砒ld togenerate urinepept叠domepfofiling ofmetab01ic syn(hme丽th e龇ly rcnaliI巧uⅨMethods(1)Six prcaIlalyticalVariables(耐ne collection methods, urim tllawing temperature, pH Values, urinary protein concen仃atioIl,MALDl-TOF targets 觚d spec仃a acquisitionmodes) were inVestigated 0nme i11fluenceof血ne peptidome profiling,aIld theprecision ofthis experimem method w嬲eValuated. (2) UriIles锄ples were collected 印idemiologic study ofMS aIldrenalinvolvement inPinggudistrict,Beijing during theperiod 0f2008舭d w嬲diagnosed by ATP IIIcriteria,wllileMS alⅫu巧were defined鼬20¨咖in≤urina巧albumin excretion(UAE)<200p咖in and estimated glomeⅢLar filtrationrate(eGFR)≥ 60m1/∥.Pa