文档介绍：专业前沿知识讲座综述论文假单细胞株M18专业:生物工程姓名:陈莹学号:20103304论点论证(50)逻辑性(20)参考文献(20)书写格式(10)论文成绩(100)评阅人假单胞菌株M18()是从上海郊区甜瓜根际分离筛选到的一株具有生物防治功能的假单胞菌新种,其生防作用部分归功于其分泌的包括1假单胞菌株M18()是从甜瓜根际土壤中分离获得的一株对多种植物病原菌具有显著拮抗作用的菌株,在菌群传感(quorumsensing)系统的调控下,能分泌吩嗪-1■竣酸(PCA)以及多种吩嗪(phz)类衍生物的抗真菌物质。全局性因子GacA是M18菌株吩嗪类物质的合成与菌群传感系统的重要调控因了,木文将就GacA对上述两者的调控做进一步研究。【方法】PCR基因扩增和测序研究Ml8菌株中PCA合成基因篷,运用RT-PCR及构建phzA-lacZ转录融合手段研究M18菊株中两个phz基因簇各自的转录特征以及受全局性因了GacA的调控作用,运用翻译融合手段进一步研究M18菌株中GacA对菌群传感系统的调控作用。【结果】M18菌株的染色体中存在肴两个PCA合成基因簇phzAl-,与铜绿假单胞菌株()PAOl的致性达99%。但是,M18菌株phzA2-G2基因篷下游的非编码区与PAO1菌株不同,存在着三段单位长度为144bp的重复序列;在野生菌株M18中,phzAl-Gl的转录水平明显高于phzA2-G2,GacA促进phzAl-Gl转录,抑制phzA2-G2转录,区别性地调控两个phz基因篷的转录,GacA在整体上抑制phz基因簇的转荥,与PAO1菌株中,GacA对phz的调控方式相反;gacA基因突变对菌群传感系统+lux家族基因中的Iasi表达量无显著影响,但正调控las系统下游的rhll表达量,GacA对phz基因族表达的调控部分通过菌群传感系统实现。【结论】在M18菌株和PAO1菌株中,GacA对吩嗪类产物合成的调控方式相反,对菌群传感系统的调控也存在肴差异性,这些差异可能是两个菌株在各|'|不同生境1摘要假单胞菌株M18()是从上海郊区甜瓜根际分离筛选到的一株具有生物防治功能的假单胞菌新种,其生防作用部分归功于其分泌的包括藤黄绿脓菌素(pyoluteorin,Pit)和吩嗪-1-埃酸(phenazine-1-carboxylicacid,PCA)在内的多个抗生物质。本研究试图在分子水平上了解M18菌株中phz合成基因簇的组成及GacA对M18菌株phz合成基因族及菌群传感系统的调控。本研究内容主要包括三个方面:第一方面,根据假单胞菌株M18兼有荧光假单胞菌和铜绿假单胞菌的遗传学背景,而且假单胞菌株M18与铜绿假单胞菌均可以产生PCA,推测M18菌株与铜绿假单胞菌具有类似的phz合成基因簇。据此,设计保守引物并扩增得到M18的phz合成基因就,序列分析显示,假单胞菌株M18与铜绿假单胞菌株PAO1(PseudomonasaeruginosaPAO1)中的phz合成基因簇高度相似,各功能基因的同源性均在99%以上。但是,M18菌株phzA2-G2基因簇下游的非编码区与PA01菌株不同,存在着三段单位长度为144bp的重复