文档介绍：毕业论文实验报告学生姓名:石书鹏学号:20080357学院: 生命科学与技术学院专业:08生物工程2班论文题目:木瓜多糖的提取工艺研究指导教师:吴耀辉副教授评阅教师:王卫讲师2012年4月20日本课题要研究或解决的问题和拟采用的研究手段(途径):本实验对木瓜中水溶性多糖的提取工艺进行了研究,多糖类化合物具有强亲水性,极易溶于水,和在亲水性比较强的乙醇中也难于溶解的性质,确定采用水提醇沉(水作为溶剂,乙醇来沉淀多糖)的方法提取多糖。分析提取时间、提取温度、固液比、提取次数对多糖提取率的影响,确定其最佳工艺条件。并且对多糖的抗氧活性进行探讨,为木瓜的综合利用提供依据。%乙醇,无水乙醇(分析纯),苯酚(分析纯),浓硫酸(分析纯),蒸馏水,葡萄糖(分析纯),粉碎机,鼓风干燥机,布氏漏斗,高速离心机,旋转蒸发仪,恒温水浴锅,752C紫外分光光度计,滴管,移液管,漏斗,烧杯,滴定管,锥形瓶等。,洗净后,在温度50℃下烘干,经粉碎机粉碎后过60目筛,收集粉末。,在设定条件下恒温浸提,并不断搅拌。,弃掉滤渣,得澄清浸提液。浸提液用台式高速离心机进行离心5min,转速3500r/min。。%的乙醇溶液中,静置24h以上。,并用无水乙醇洗涤2次~3次,再次离心(转速3500r/min,时间5min),收集沉淀物。℃干燥至恒重的无水葡萄糖标准品25mg,置于250ml容量瓶中,,、、、、、、、、、、,分置于试管中,。,然后振荡混匀,置于沸水浴中加热30-35min,流水冷却,于波长490nm处测定吸光度值。以吸光值A为纵坐标溶液浓度(mg/ml)为横坐标绘制标准曲线。,定容到100ml。,再用移液管加入显色液5ml,于沸水浴中加热30-35min后于波长为490nm的分光光度计中测量吸光度。根据标准曲线、回归方程计算粗多糖含量,再由含量求出木瓜竹叶中多糖的含量。计算公式为:C×V×n木瓜多糖提取率=×100%(1)m式中:C—提取液中木瓜多糖的浓度(g/ml)m—称取的木瓜质量(g)n—稀释倍数V—粗多糖(m1)..,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制葡萄糖标准曲线,如图1。图1葡萄糖标准曲线由图1可知,葡萄糖与吸光度呈良好的线性关系,其回归方程:y=-(3)相关系数:R2=,y为吸光度。[44],包括浸提温度、浸提时间、浸提时的液固比。从而找出这些因素影响木瓜多糖得率的大小和作用范围,为响应面实验的设计提供依据。,各加入50ml蒸馏水,在80。C下提取,,,,,,,再用苯酚-硫酸法测定其多糖的含量,最后分析结果。见表2与图2:表2浸提时间与多糖吸光度提取率的关系浸提时间/%:随着浸提时间的增加,多糖得率也增加,,多糖得率反而下降,故再增加提取时间对多糖得率增加不明显,说明多糖已经基本析出。,每份1g,各加入50ml蒸馏水,分别在温度50。C、60。C、70。C、80。C、