文档介绍：实验一缓冲溶液的配制和性质、溶液pH值测定【实验目的】学****缓冲溶液及常用等渗磷酸盐缓冲溶液的配制方法。加深对缓冲溶液性质的理解。强化吸量管的使用方法。学****使用pHS-2C型酸度计。培养环境保护意识。【预****作业】一般性溶液与缓冲溶液有什么不同?缓冲溶液的性质有哪些?如何衡量缓冲溶液的缓冲能力大小?缓冲溶液的缓冲能力与什么因素有关?实验是如何设计以验证缓冲溶液所具有的性质及缓冲容量的影响因素的, 设计时有哪些注意事项?该如何检测缓冲溶液的pH值是否发生改变?是否均需要用pH计?本实验属定量测定还是定性测定或半定量测定?【实验原理】普通溶液不具备抗酸、抗碱、抗稀释作用。缓冲溶液通常是由足够浓度的弱酸及其共轭碱、 弱碱及其共轭酸或多元酸的酸式盐及其次级盐组成的,具有抵抗外加的少量强酸或强碱、或适当稀释而保持溶液 pH值基本不变的作用。本实验通过将普通溶液和配制成的缓冲溶液对加入酸、碱或适当稀释前后 pH数值的变化来探讨缓冲溶液的性质。根据缓冲溶液中共轭酸碱对所存在的质子转移平衡:一+HB?B+H30缓冲溶液pH值的计算公式为:pH=pKalg[B_][HB]-pKa lg[共轭碱][共轭酸]pKa lg缓冲比式中pKa为共轭酸解离常数的负对数。此式表明:缓冲溶液的pH值主要取决于弱酸的pKa值,其次决定于其缓冲比。需注意的是,由上述公式算得的pH值是近似的,准确的计算应该用活度而不应该用浓度。要配制准确pH值的缓冲溶液,可参考有关手册和参考书上的配方,它们的 pH值是由精确的实验方法确定的。缓冲容量(3)是衡量缓冲能力大小的尺度。缓冲容量( 3)的大小与缓冲溶液总浓度、缓冲组分的比值有关。[HB]X[B_] [B一]3= —=[HB]+[B一] 1+缓冲比缓冲溶液总浓度越大则3越大;缓冲比越趋向于1,则3越大,当缓冲比为1时,3达极大值。实验室中最简单的测定缓冲容量的方法是利用酸碱指示剂变色来进行判断的。 例如:本实验就使用了***红指示剂。表2-3-1***〜>(等渗磷酸盐缓冲盐水)作为体外细胞缓冲培养液。 PBS是与人体血浆渗透压(280〜320mOsmolL-1)等渗,并与人体血液pH值⑺35〜)一致的含有NaCI、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等物质的磷酸盐缓冲液。根据不同用途, PBS有不同的配制方法,女口用于细胞培养的pbs配方为:8gNaCl,,,,加水至800ml,,补水至1L,消毒灭菌既得。其在水溶液中的质子转移平衡如下:一 2一 +H2PO4+H2O?H2PO4+H3O Ka2由上式可知该缓冲液pH的计算公式为pH二pKalg[共轭碱][共轭酸]=pKa2lg[HPO7][KH2PO4]该公式计算出来的数值由于未考虑溶液的活度,所以所得的数值仍为近似值。【仪器与试剂】仪器:吸量管(5mLX5,10mLK5),比色管(20mLX4),量筒(10mL),烧杯(50mLX6),试管(10mLX6,20mLK6),滴管,玻棒,洗瓶, pHS-2C型酸度计等试剂:-1HAc,,-1NaAc,