文档介绍：南华大学
硕士学位论文
CGRP对血管平滑肌细胞增殖及CDK2和Cyclin E表达的影响
姓名:邓水秀
申请学位级别:硕士
专业:药理学
指导教师:秦旭平;廖端芳
20070501
原创性声明

本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作
及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方
外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获
得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的
同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。

作者签名: 日期: 年月日

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作者签名: 导师签名: 日期: 年月日

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CGRP 对血管平滑肌细胞增殖及 CDK2 和 Cyclin E 表达的影响

研究生: 邓水秀
指导教师: 秦旭平副教授
廖端芳教授
摘要
目的: 观察降钙素基因相关肽(CGRP)对胎牛血清(FBS)刺激的大鼠血管平
滑肌细胞(VSMCs)增殖作用的影响,并探索此作用与细胞外信号调节
激酶(ERK1/2)和细胞周期调节蛋白 CDK2、CyclinE 的关系。
方法: 组织贴块法体外培养大鼠胸主动脉 VSMCs,取其第 3 ~ 10 代用于实验。
静止期细胞用不同浓度 CGRP 处理 30 min 后再加以血清刺激细胞 24 h,
噻唑蓝比色法(MTT)观察 CGRP 对 VSMCs 增殖的浓度效应;取最适
浓度的 CGRP 预孵育 VSMCs 30min 后,加入 10%FBS(12 h、24 h、48 h),
MTT 观察 CGRP 对血清诱导大鼠 VSMCs 增殖的影响;流式细胞仪
(FCM)观察分析 VSMCs 细胞周期分布特征的改变;Western blot 检测
细胞内 p-ERK1/2、CDK2 和 CyclinE 的表达。
-1
结果: MTT 法显示 CGRP( ~ 100 nmol·L )能浓度依赖性地抑制大鼠 VSMCs
的增殖,10 nmol·L-1CGRP 预孵育 VSMCs 30min 后,能降低 10%FBS 诱
导的大鼠 VSMCs 的生存率;流式细胞仪分析 10 nmol·L-1 CGRP 预孵育
后能降低血清诱导的细胞 S 期细胞百分比,升高 G1 期细胞百分比,降低
细胞增殖指数(PI);Western blot 检测结果显示,10 nmol·L-1CGRP 干预
下能抑制血清刺激的大鼠 VSMCs 内 p-ERK1/2、CDK2 和 CyclinE 的表
-1
达;50 nmol·L CGRP8-37(CGRP 受体拮抗剂)能部分减弱 CGRP 的抑
制作用。
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结论: CGRP 能抑制血清诱导大鼠 VSMCs 的增殖,其机制可能是通过抑制细
胞 ERK1/2 信号通路,下调细胞周期调节蛋白 CDK2 和 CyclinE 的表达,
阻滞细胞周期由 G1 期进入 S 期而发挥作用
关键词: 血管平滑肌细胞;CGRP;增殖;p-ERK1/2;CDK2;CyclinE

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Effect of CGRP on the proliferation of vascular smooth cell and
expression of CDK2 and Cyclin E

[ Abstract ]

AIM To investigate the effect of calcitonin gene-related peptide(CGRP)
on the proliferation of vascular smooth muscle cells induced by
10%FBS, and further explore whether this effect is related to the
activity of ERK1/2 and the expression of CDK2 ,CyclinE.
METHODS Vascular smooth muscle cells(VSMCs)wer