文档介绍：凝胶电泳结果分析常见问题原因对策 DN A 条带模糊 DNA 降解实验过程中应避免核酸酶污染。电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低, PH 值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。 TBE 建议使用 10 就更换。所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过 20V/cm ,温度<30 ℃,巨大 DNA 链电泳, 温度<15 ℃, 检查所用电泳缓冲液的缓冲能力, 注意经常更换。 DNA 上样量过多减少凝胶中 DNA 上样量 DNA 含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除多余盐分。有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白。 DNA 变性电泳前勿加热,用 20mM NaCl 缓冲液稀释 DNA 。出现片状拖带或涂抹带 PCR 扩增时出现涂抹带、片状带或地毯样带, 往往由于酶量多或者酶的质量差, dNT P 浓度高, Mg2+ 浓度高,退火温度过低, 循环次数多。减少酶量或更换酶,减少 dNTP 浓度,适当降低 Mg2+ 浓度, 增加模板量, 减少循环次数。不规则 DN A 带迁移电泳条件不合适电泳时电压不应超过 20V/cm ,温度<30 ℃,巨大 DNA 链电泳, 温度<15 ℃, 检查所用电泳缓冲液的缓冲能力, 注意经常更换。 DNA 变性电泳前勿加热,用 20mM NaCl 缓冲液稀释 DNA 。带弱或无 DN A 带 DNA 上样量不够增加 DNA 上样量, 聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度高, 上样量可适当降低。 DNA 降解实验过程中应避免核酸酶污染。 DNA 跑出凝胶缩短电泳时间, 降低电压, 增加凝胶浓度。 EB 染色的 DNA 所用光源不合适应用短波长( 254nm )的紫外光源。 DNA 带缺尖 DNA 跑出凝胶缩短电泳时间, 降低电压, 增加凝胶浓度。分子大小相近的 DN A 带不易分辨增加电泳时间,核准正确凝胶浓度 DNA 变性电泳前勿加热,用 20mM NaCl 缓冲液稀释 DNA 。 DNA 链巨大,常规凝胶电泳不合适。在脉冲凝胶电泳上个分析。电泳时 ladde r 扭曲配胶的缓冲液与电泳的缓冲液不是同时配制。同时配制,电泳缓冲液高出胶的 1-2m m 即可。电泳时电压过高电泳时电压不应超过 20V/cm 。