罗氏实时荧光定量PCR仪 精选文档.ppt

文档介绍：实时荧光定量PCR仪一、实时荧光定量PCR的原理荧光定量PCR通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对结果进行分析,计算待测样品的初始模板量。荧光定量PCR仪荧光定量PCR仪是一种带有激发光源和荧光信号检测系统的PCR仪,通常配有电脑系统及相应的分析软件。定量PCR技术的产生?1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB内插染料法插至双链DNA,D的PCR仪检测样品的荧光强度?PCR循环=双链DNA=染料=荧光?后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB荧光定量实时PCR与普通PCR的比较?实时在线监控对样品扩增的整个过程进行实时监控,能够实时地观察到产物的增加,直观地看到反应的对数期?降低反应的非特异性使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合,提高了PCR反应的特异性?增加定量的精确性全程监控,准确的算法进行定量?结果分析更加快捷方便,无需跑胶罗氏产品介绍以及与同类产品之间的对比一、?:1、空气加热2、毛细管反应体系优点:1、升降温速度快(℃-20℃/秒),2、体系均一,不存在边缘现象3、把反应体系缩小到0-20ul,节省试剂成本实现快速PCR光学结构特点:1、免维护的LED冷光源,寿命长达2万小时以上2、光学倍增管(Rodenstock)3、多达6通道()和3通道()实时检测优点:1、毛细管光学特性将光线散射、衍射降至最低,避免LED功率低的问题2、免维护,带自动检验功能3、轻易实现内标、内对照及多重PCR