文档介绍：河北医科大学
硕士学位论文
Caspase-3和Bcl-2在新生大鼠缺氧缺血后大脑皮质区的表达及
bFGF对其表达的影响
姓名:王军
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:陈琍

和在新生大鼠缺氧缺血后大脑皮质区的表达及对其表达的影响要目的:围产期缺氧缺血性脑损伤是导致儿童神经系统保护的途径之一。本研究在用新生樟鋀笫笾备围产期缺氧缺血脑损伤,P偷幕∩希妹庖咦橹Ъ际醵大脑皮质区的表达变化以探讨其对缺氧缺血脑损伤中神经细胞凋亡与抗凋亡病理过程的作用及碱性成纤维细胞生长因子对它们表达的影响,为临床应用神经营养类药物提供实验及理论依据。材料和方法:P椭票福貉∮眯律日龄大大鼠常规酒精消毒局麻%普鲁卡因蠊潭ㄔ手术台上,切开颈部皮肤,游离并结扎左侧颈总动脉后缝合颈部皮肤。放回原饲养环境恢复小时后,置入自制的常压缺氧舱,吸入由纯氮气和空气混合的、⑽植漳谖露,摘发育障碍及后遗症的严重疾病,已知脑损伤后迟发性神经元死亡以凋亡为主。抑制缺氧缺血后神经元过度凋亡是脑量分析促凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶涂沟蛲蛋白赴馨土觯鞍自谛律笫笕毖跞毖:鼠淠缘姆⒂锥斡胄律錾弊钕嗨唬养中等,=律日龄∈焙笕〕
只和治疗组只。舳樵偎婊殖个组:治疗各组于模型制备完成后依照上述分组给予腹腔注射侧大脑皮质区可见个别细胞核固缩;小时后有点状细将皇笛槎锼婊殖扇毖跞毖D运鹕Ⅷ孔只籦瘟谱橐菜婊殖个组:后以上楦髯樵偎婊殖晌#、、和孔只M鄙枇⒓偈质踝切开乳鼠颈部皮肤,游离左侧颈总动脉,但不结扎也不进行缺氧处理,手术完成后断头取脑只作为空白对照组。┪锔稍ぃ篵脑,放入ザ嗑奂兹┮汗潭个小时,石蜡包埋,常规切片,染色光镜下观察形态学变化;免疫组织化学染色检测脑皮质虰蛋白表达,并应用系列病理图象分析系统检测在豆饩祃鍪右跋碌阳性细胞数和面密度值。电镜标本用%戊二醛固定,锇酸后固定,树脂包埋,超薄切片。电镜观察并拍片。死,中心区正常脑组织结构破坏,周边区细胞排列不规则,行动障碍,肌力下降,平衡失常,翻身不能或困难,夹尾左旋苑⒆笮和夹尾不叫等。凡符合上述标准者归入模型,余者排除。锓肿椋耗P椭票竿瓿珊螅和立即给药组、后旄┳椤天给药组,×/刻次:各组腹腔注射等量生理盐水,每天一次,做实验对照组。〔挠牍潭ǎ各组和治疗各组在各个时间点依次断头取结果:饩染色喝毖跞毖:小时左胞坏死,细胞间隙增大;小时后可见典型的局灶性坏为、中文摘要、
核仁稍增大。⑨少突胶质细胞:电子密度增高,线粒体水肿,嵴部分断裂消失。④血管内皮细胞:胞质细胞器内皮间连接琉松,内皮下基膜模糊,不连续。#荷窬赴飨灾渍停缓四ぞ植②星形胶质细胞:细胞突起不规则,胞体轻度肿胀:胞伴随神经细胞的异染色质轻度边集于核膜下,线粒体轻度减少,胞质电子密度增高;毛细血管内膜厚度不均,血管性细胞数.±.,面密度。...;与假手术组比较,脑损伤后鞍妆泶锎锔叻蕖.±胞体缩小呈三角形,胞核浓缩深染,星形胶质细胞肿胀;.小时后出现局灶性出血,伴有淋巴细胞浸润;出血有突起,异染色质轻度边集于核膜下,核仁不清;细胞质电子密度减低,线粒体空泡变性,嵴部分断裂消失,粗面内质网扩张成囊池状,排列松散,部分粗面内质网脱颗粒。质细胞器减少,胞质内出现空泡,粗面内质网排列不规则;轻度水肿嵴部分断裂消失,粗面内质网扩张成囊池状;.;。中文摘要
差分析有显著性差异∞,而且在时间和数值上保持一致性。脑损伤后蟛啻竽云ぶ是粜韵赴J枷性神经元大量表达,排列不规则,胞浆染色深。脑损伤后脑损伤后立即应用各组与相应时间点的模型各伤后旄└髯橛胂嘤κ奔涞愕哪P透髯楸冉涎粜韵赴数和面密度值无显著性差异。脑损伤后旄┝瘟.,.②;正常的新生日龄大鼠的大脑皮质有鞍椎纳倭勘泶阳性细胞数著增加.±.’.;与假手术组比较,.:随之蛋白表达开始下降,但仍保持较高的水平至脑损伤后..±,无免疫组化染色阳性神经元;而在坏死区周边的半暗代区阳±.,.;仍然有蛋白表达。组比较鞍妆泶即阳性细胞数和面密度降低,经独立样本煅榱搅奖冉嫌邢灾圆钜臁D运±.,...,.;与..±和.±中文摘要.,
与假手术组比