文档介绍：选修3必背知识点质粒必背条件:能在宿主细胞中自我复制并稳定的保存;质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点供外源DN***段插入其中;具有某些标记基因便于筛选;安全,不会对受体细胞有害;大小合适;基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DN***段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。基因组文库包含了一种生物的所有基因。部分基因文库只包含了一种生物的一部分基因。基因表达载体的构建目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止子、以及标记基因等。目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,成为转化。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数植物没有感染能力。将目的基因导入微生物细胞:首先用钙离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。目的基因的检测与鉴定,首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因(DNA分子杂交技术),其次还需检测目的基因是否转录出了mRNA(分子杂交技术,用标记的目的基因做探针),最后检测目的基因是否翻译成蛋白质(抗原-抗体杂交)。动物基因工程前景:用于提高动物生长速度;用于改善畜产品的品质(科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大减低,而其它营养成份不受影响);用转基因动物生产药物(乳腺/房生物反应器);用转基因动物做器官移植的供体(实现这一目的的最大难题是免疫排斥)。细胞脱分化就是让已经分化的细胞,经过诱导后失去特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。在植物中一些分化的细胞经过激素的诱导可以脱分化为具有分生能力的薄壁细胞,进而形成植物的愈伤组织。愈伤组织在一定的培养条件下,又可以再分化出幼根和芽,形成完整的小植株。植物体细胞杂交要克服不同生物远缘杂交的障碍。植物体细胞杂交:人工诱导原生植体融合的物理法包括离、振动、电激等;化学法一般是用聚乙二醇作为诱导剂。植物细胞工程的实际应用:微型繁殖(属无性繁殖,可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效快速的实现种苗的大量繁殖)、作物脱毒(科学家们发现植物分生区附近(如茎尖)的病毒的极少,甚至无病毒(代谢旺盛))、人工种子(以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、定芽和腋芽等材料,经过人工薄膜包装得到的种子)。动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞和移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。传代培养的细胞一般传至十代后就不易传下去了。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为十代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。动物体细胞和移植中去核一步可用微型吸管把细胞核与第一极体一并吸出(MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体)。制备单克隆抗体最终将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中就可以提取出大量的单克隆抗体了单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强、灵敏度高,并可大量。单克隆抗体在诊断的应用上,具有准确、高效、简易、快速的优点。精子的细胞核变为精子头的主要部分