文档介绍:综合实验一兔血清免疫球蛋白分离与纯化主讲教师:、早退、不旷课、有事请假穿白大褂、注意自我防护不能喧哗,不做与实验无关的事认真完成实验报告值日要求:擦桌子、拖地、擦黑板、倒垃圾、、实验目的二、实验原理三、实验仪器及试剂四、实验步骤五、注意事项六、、实验目的学****并掌握盐析法的原理及用盐析法进行免疫球蛋白分离与纯化的技术。(IgG).抗体结构抗体分子是由两条轻链(lightchain,L链)和两条重链(heavychain,H链)通过链间二硫键连接而成。.二、实验原理一盐析当用中性盐加入蛋白质溶液,中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质,于是蛋白质分子周围的水化膜减弱甚至消失;同时,中性盐加入蛋白质溶液后,由于离子强度发生改变,蛋白质表面电荷大量被中和,更加导致蛋白质溶解度降低,使蛋白质分子之间聚集而沉淀,这个过程叫做盐析。.实验原理-盐析不同蛋白质由于所带电荷不同以及水化程度不同,加入不同浓度的中性盐可分阶段从溶液中沉淀出来。、:血清(兔免疫血清)。:、、、饱和硫酸按(用前以5mol/)、奈氏试剂。.三、:三角瓶、烧杯、各种吸管、小试管、量筒、布氏漏斗、透析袋(用前用PBS或双蒸水煮沸10min)、饭盒(装碎冰)等。:搅拌器、离心机等。、实验试剂饱和硫酸铵溶液的配制:称(NH4)2SO4400~425克,以70~80℃之蒸馏水500ml溶解,搅拌20分钟,趁热过滤。冷却后以浓氨水(28%氨溶液)。配制好的饱和硫酸铵,瓶底应有结晶析出。.