文档介绍：紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告紫外分光光度法测定蛋白质含量一、;。二、:①测参数法:折射率、相对密度、紫外吸收等;②基于化学反应:定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280nm附近(不同蛋白质略有不同)。在最大吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差,原因有二:①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一定误差,故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质;②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质,会出现较大干扰。三、仪器与试剂TU―1901紫外可见分光光度计、·mL-1、%NaCl溶液、试样蛋白质溶液。10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。四、·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中,%NaCl溶液稀释至刻度,摇匀。用1cm石英比色皿,%NaCl溶液作参比溶液,在190~400nm间每隔5nm测一次吸光度Abs,记录数据并作图。、、、、·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中,%NaCl溶液稀释至刻度,摇匀。用1cm石英比色皿,%NaCl溶液作参比溶液,在波长280nm处分别测其吸光度,记录数据并作图。,在波长280nm处测其吸光度,重复三次。在已经得到标准曲线的情况下,为了使测量结果准确度高,待测溶液的浓度需在标准曲线的线性范围内,所以,先测定试样蛋白质原液的吸光度(),估算浓度为2