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蛋白质分析鉴定.ppt

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蛋白质分析鉴定.ppt

上传人:新起点 2020/7/23 文件大小:1.75 MB

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文档介绍

文档介绍:第六章 蛋白质的分析和鉴定技术第一节 蛋白质的物理化学性质分析蛋白质由氨基酸构成,具有氨基酸的一些功能基团,保留了一些氨基酸的性质,但又发生了质的变化,具备一些氨基酸没有的性质。、蛋白质的两性解离和等电点两性解离:蛋白质是两性电解质,解离情况比氨基酸复杂得多。在特定的pH值范围内,蛋白质解离产生带正电荷或负电荷的基团,分折蛋白质的滴定曲线可得到各解离基团的PK′值等电点pI指某一pH值时,蛋白质所带正负电荷恰好相等,净电荷为0,此时溶液的pH值称为等电点。蛋白质分子所带电荷的性质和数量由蛋白质分子中可解离基团的种类和数目、溶液pH值所决定。pH大于pI,蛋白质带负荷,电场中向阳极移动pH=pI,电场中不移动,蛋白质沉淀出,此时导电率、渗透压、粘度等均达最低值。pH小于pI,蛋白质分子带正电荷,电场向阴极移动。蛋白质的等离子点(特征常数):指在纯水中(即没有其它盐类存在)蛋白质的正离子数等于负离子数的pH值。因蛋白质的等电点不是一成不变的,它随溶剂性质、离子强变等因素而改变。二、蛋白质分子的大小相对分子质量Mr从一万到几百万或更大,对Mr的测定,按性质分两类:,并假定蛋白质分子中含1个这种元素,,包括测定质点的:扩散系数、沉降超离心、凝胶过滤、渗透压等。渗透压测定法最为方便,但准确度较差,超离心法最为准确,但需昂贵的超速离心机,三、蛋白体的胶体性质胶体:指质点大小在1nm-100nm范围内所构成的分散系统蛋白分子直径2nm-20nm,其溶液是胶溶液并且其分子表面分布有亲水氨基酸的极性R基,是一种亲水胶体,具有亲水胶体的性质:1、具有半通透性2、丁达尔效应3、布朗运动等。蛋白质相对分子质量大,在溶液中形成的颗粒大,不能通过半透膜。透析:利用蛋白质不能通过半透膜的性质将其与小分子物质分开的分离方法