文档介绍：:..植物细胞的活体染色与死活鉴定原理:活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染料之一,它是-利弱碱性pH指示剂,-(山红变黄)。在酸性条件下中性红解离度很强,带色的阳离子呈樱桃红色,在pH7以上,它不解离而以分子态溶于水呈橙黄色的溶液。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,山于液泡在—•般情况下呈酸性反应。因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色,在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色;死细胞山于原生质变性凝固,胞液不能维持在液泡内。因此,用中性红染色后,不产生液泡着色现象。相反,中性红的阳离子,却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合,而使原生质与细胞核染色。仪器与用具:显微镜;载玻片;盖玻片;单面刀片;尖头锡子;酒精灯;火柴;吸水纸适量。试剂:%中性红溶液;lmol/L硝酸钾溶液方法:1、切下一•片较幼嫩的洋葱鳞片,,用尖头锻子将内表皮小块轻轻撕下,将制好的洋葱鳞茎内表皮放置于滴加蒸馅水的载玻片上,小心地将制片平展到我玻片上,加盖玻片,多余液体用吸水纸吸干,在显微镜下观察(注意调节光线强度)2、另取一小块表皮,%的中性红溶液,染色5-10min;在蒸循水中稍加冲洗,在载玻片上滴一滴蒸饷水,小心地将制片平展到载玻片上,加盖玻片,多余液体用吸水纸吸干,在显微镜下观察。3、 -15min,再置于载玻片上镜检(为了确证中性红染色部位,可将上述洋葱内表皮染片浸入lmol/L的硝酸钾溶液中浸泡lOmin左右,然后取出观察。)4、将步骤3中的活体制片放在酒精灯火焰上微微加热,以杀死细胞,再在显微镜下观察实验结果:第一步观察到细胞呈长条状,无色;第二步观察到全部均染色较浅的活细胞,同时还有细胞核呈红色的死细胞;第三步观察到细胞颜色比第二步的要深•些,在硝酸钾溶液中浸泡后观察到质壁分离现象,液泡凝缩成红色液滴,与细胞壁分离;第四步因细胞死亡,观察到红色细胞核。