文档介绍：分类号:R3 单位代码:10752
密级:公开学号:2009061
宁夏医科大学
硕士研究生学位论文
组蛋白 H3K9 甲基
化调节胶质瘤肿瘤干细胞自我复制的研究
Regulation of Histone H3K9 Methylation
on the Selfrenew of Glioma Cancer Stem Cells
学位申请人: 李海英
指导教师: 扈启宽教授
申请学位门类级别: 理学
专业名称: 生理学
研究方向: 神经生理学
所在学院: 基础医学院
论文完成日期: 二〇一二年四月
宁夏医科大学研究生院
Ningxia Medical University
Thesis for Application of Master’s Degree
Regulation of Histone H3K9 Methylation
on the Selfrenew of Glioma Cancer Stem Cells
Student’s Name: Li Haiying
Supervisor: Hu Qikuan Pro
Subject Category: Science
Major: Physiology
Specialty: Neurophysiology
School: Basic Medical College
Completion Date: Apr, 2012
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年月日年月日
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年月日年月日
宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要
组蛋白 H3K9 甲基化调节胶质瘤肿瘤干细胞自我复制的研究
摘要
目的:肿瘤干细胞是肿瘤组织中一小群具有自我复制和多向分化潜能的特殊细
胞,其自我复制受到转录因子、染色质结构、内外环境等多种因素的复杂调控。组
蛋白H3赖氨酸9(H3K9)甲基化修饰是调控肿瘤干细胞自我复制的重要机制,在正
常分化细胞与肿瘤细胞中起抑制基因表达的作用。H3K9甲基化对自我复制相关基因
的抑制可能与肿瘤干细胞向肿瘤细胞的分化有关。因此我们推测,使用特异性的组
蛋白甲基化转移酶抑制剂解除组蛋白甲基化对自我复制相关基因的抑制,就能促进
肿瘤细胞转化为肿瘤干细胞。也就是说在体内条件下,内外环境的刺激如果降低了
组蛋白甲基化的抑制,就有可能促进肿瘤干细胞的发生或肿瘤的复发,这可能是体
内肿瘤干细胞发生的重要启动机制之一。本文针对这一假说设计了一系列实验,探
讨H3K9甲基化对胶质瘤干细胞自我复制的影响;以及H3K9甲基化与干细胞的核心转
录因子Sox2和肿瘤干细胞的标志分子CD133之间的关系。
方法:本文使用了胶质瘤细胞株U251、U87;三种抑制剂:5-Azacytidine(5-aza),
DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂;Bix01294(Bix) ,H3K9组蛋白甲基转移酶G9a抑
制剂;Sodium butyrate(SB),组蛋白去乙酰化酶抑制剂进行以下实验:(1)用体外克
隆成球率实验研究对自我复制的影响;用软琼脂克隆实验研究对致瘤性的影响;用
Real-TimePCR和Western blot等方法研究对干细胞标志分子CD133表达的影响;(2)在
体外克隆成球培养条件下,使用上述抑制剂处理,并用Real-TimePCR和Western blot
等方法研究对Sox2/CD133/Oct4等干细胞核心转录因子表达的影响;(3)使用H