文档介绍：石杉碱甲提取工艺与关键酶基因研究进展李枝,高睿婷,冯伟杰,韩文霞*,张晓虎,杨凯,王萌(西安医学院,陕西西安710021)摘要:阿尔兹海默病是一种神经退化性疾病,石杉碱甲作为一种强效可逆胆碱酯酶抑制剂,成为国内外治疗的首选药物之一。但因石杉碱甲植物提取原料短缺产量低,无法满足市场需求。近年研究可采用酸浸取,酶辅超声,双水相萃取或氯仿萃取,%提高到5%,生产周期从一个月缩短致2天左右。通过优化提取工艺可使提取率大大提高,但要解决石杉碱甲产量过低的根本问题,还需从分子生物学层面入手,寻找编码石杉碱甲生物合成过程中的关键酶基因,进而利用基因工程方法改造菌种,从而达到工业化生产要求。目前报道的赖氨酸脱羧酶,酮胺氧化酶,N-甲基转移酶,细胞色素P450推测均不是限速酶,而加双氧酶极有可能为限速酶。关键词:石杉碱甲,提取工艺,生物合成,关键酶基因AdvancesinextractiontechnologyandkeyenzymegenesofHuperzine-AAbstract:Alzheimer',Huperzine-,duetotheshortageofrawmaterialsforHuperzine-Aextractionandthelowproductioncannotmeetthemarketrecentyears,acidextraction,enzyme-assistedultrasound,aqueoustwophaseextractionorchloroformextraction,columnchromatographyandpurificationofcationexchangeresinhavebeenusedtoincreasetheextractionrateofHuperzine-%to5%,,tosolvethefundamentalproblemoftoolowyieldofHuperzine-A,thekeyenzymegenesinthebiosynthesisprocessofHuperzine-Ashouldbefoundoutfromthemolecularbiologylevel,icengineeringtomeettherequirementsofindustriallysinedecarboxylase,ketosamineoxidase,N-methyltransferaseandcytochromeP450reportedsofararenotthekeyenzymes,:Huperzine-A,extractionprocess,biosynthesis,keyenzymegenes阿尔兹海默病(Alzheimer'sdisease简称AD),即老年痴呆症,是致死性神经退行性疾病,表现为认知和记忆能力降低,多发于65岁以上人群。随着社会发展,老龄化速度的加快,AD的患病率也逐渐上升。据统计,到2015年为止,全世界65岁以上人口患有AD的有5000多万[1],并且估算2020年将增加达到50%,。,患有AD的患者大约300-400万,%,并且每年以三四十万的速度增加。据统计美国在2000年AD例已有450万例。石杉碱甲具抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性高、毒副作用低、可提高记忆力和保护心血管等特点,成为治疗AD最有前景的天然药物。石杉碱甲(Huperzine-A,简称HupA)是一种从石杉科植物蛇足石杉(千层塔)中提取出来的一种生物碱,属强效的可逆性乙酰胆碱酯酶抑制剂,对老年痴呆症、单纯记忆障碍、重症肌无力具有显著疗效,且药效持续时间较长,无严重不良反应,是目前国内外上述病症最有效的药物。由于它的治疗指数高,且作用时间长,在国际上已被列为第二代胆碱酯酶的抑制剂之一。目前H