文档介绍：贵阳医学院
硕士学位论文
白纹伊蚊唾液腺提取物生物学活性的初步研究
姓名:闫妍
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:吴家红;包怀恩
2011-05-27
白纹伊蚊唾液腺提取物生物学活性的初步研究
专业:病原生物学
研究生:闫妍
导师:吴家红副教授
包怀恩教授
摘要
【目的】探讨白纹伊蚊(Aedes albopictus)唾液腺提取物(salviary gland extract, SGE)
生物学功能。【方法】⑴采用手工法检测 SGE 对人全血部分凝血活酶时间(activated
partial thromboplastin time ,APTT)凝血酶原时间(prothrombin time ,PT)凝血酶
时间(thrombin time ,TT)的影响;⑵采用血小板聚集仪检测 SGE 对胶原、二磷酸
腺苷(adenosine diphosphate ,ADP)和凝血酶诱导的人血小板聚集功能的影响;⑶
噻唑蓝比色法(MTT 法)检测 SGE 对 T 细胞依赖抗原卵清蛋白(OVA)特异性免
疫组和 T 细胞有丝分裂原刀豆蛋白(ConA)刺激组的 Balb/c 小鼠离体脾细胞增殖
的影响;⑷ qRT-PCR 检测 SGE 对 OVA免疫组和 ConA 刺激组 Balb/c 小鼠离体脾细
胞 Th1 和 Th2 类细胞因子的影响。【结果】⒈发现 SGE 对人血浆 APTT, PT, TT 均有
延长凝集时效作用;其中 APTT 延长具有剂量依赖性,随着 SGE 浓度的升高,APTT
显著延长凝集时间,延时可达到;血小板聚集抑制检测发现,SGE 对胶原、
ADP 和凝血酶诱导的血小板聚集均具有明显的抑制作用。低剂量 SGE 即可显著抑
制凝血酶诱导血小板聚集;而 SGE 对胶原诱导的血小板聚集抑制效应呈显著剂量依
赖性,随着 SGE 浓度的升高,对血小板聚集抑制可达到。⒉利用 MTT 法,证
实 SGE 对 OVA 免疫以及 ConA 刺激的 Balb/c 小鼠脾淋巴细胞增殖均有抑制作用。
以 OVA 特异性免疫组脾淋巴细胞增殖抑制较为明显;SGE 作用于 ConA 刺激组,
IFN-r、IL-4、IL-10 表达显著下调( P<), IL-2 表达没有明显差异( P>); SGE
作用于 OVA 免疫组,IFN-r、IL-4、IL-10、IL-2 表达没有明显差异(P>);以
ConA 刺激组较为明显。【结论】⑴初步证实白纹伊蚊 SGE 具有抗血凝作用,其机
制可能通过抑制血小板聚集和抑制内源性凝血途径起主要作用;⑵初步证实白纹伊
蚊 SGE 可在基因水平调控淋巴细胞细胞因子表达,白纹伊蚊通过抑制淋巴细胞
增殖抑制免疫反应。
关键词:白纹伊蚊; ;APTT;PT;TT;血小板;脾细胞;免疫调控
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Preliminary study on biological activity of Salivary glands extract of
Aedes albopictus
YAN yan
WU Jia-hong BAO Huai-en
(Department of Parasitology, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China)
Abstract
Object:To investigate the biological function of salivary gland extract(SGE) from
;
Methods: Incubated with different concentrations of SGE, Activated Partial
Thromboplastin Time (APTT), Prothrombin Time (PT) and Thrombin Time (TT) were
detected for the human blood plasma by handcraft measure; the inhibition of platelet
aggregation induced by Collage I, Adenosine diphosphate (ADP) and thrombin were
identified by Dual Channel Aggregometre. Cytokine production was ind