文档介绍：山东农业大学
硕士学位论文
荷叶生物碱的分析及分离纯化研究
姓名:郑振佳
申请学位级别:硕士
专业:农产品加工及贮藏工程
指导教师:王晓;王明林
2011-06-15
山东农业大学硕士学位论文 
摘要
莲为多年生水生宿根草本植物,在全世界有着广泛的分布。同时,莲也是我国最具
特色、栽培面积最大、品系资源最丰富的水生经济植物。荷叶是睡莲科莲属植物的叶,
营养丰富且含有生物碱和黄酮等多种活性物质,是非常具有开发价值的天然植物资源。
本研究通过对荷叶生物碱的分析以及分离纯化研究,为荷叶资源的进一步开发利用提供
科学依据。主要研究结果如下:
1. 本研究利用阳离子固相萃取柱的定向吸附特性对样品进行净化,利用快速分离液
相-飞行时间质谱提供的精确分子质量数,快速鉴定荷叶生物碱。样品采用 1%盐酸超声
提取,经固相萃取柱净化,再用氨水-甲醇进行洗脱,洗脱液浓缩后用甲醇定容。选用
Welch Materials C18 柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,在正离子模式下,经飞行时
间质谱分析,分离并检测了 9 种生物碱。实验建立的快速分离液相-四级杆飞行时间串
联质谱结合阳离子交换固相萃取柱前处理技术,可以快速准确鉴定荷叶生物碱成分。
2. 本研究建立了荷叶中生物碱类化合物的快速分离纯化技术。通过实验优化得到了
三个荷叶生物碱分离体系,分别为:四氯化碳/氯仿/甲醇/ M 盐酸(1/3/3/2,V/V)常
规高速逆流分离体系和石油醚/乙酸乙酯/甲醇/水(5/5/2/8,V/V)、叔丁基甲醚/甲醇/水
(4/1/5,V/V)两个 pH 区带逆流色谱分离体系。分离得到的 4 个生物碱单体纯度均大于
98%,且经过质谱和核磁共振对化合物进行了结构的鉴定。结果表明 pH 区带逆流色谱
法是一种高效的分离制备荷叶生物碱的技术。
3. 采用超声提取-高效液相联用分析荷叶中的 O-去甲荷叶碱、N-去甲荷叶碱、荷叶
碱和莲碱四种主要的生物碱,为荷叶及相关产品的质量控制参考。选用 Welch Materials
C18 色谱柱,以乙腈-水(含 %三乙胺)为流动相进行梯度洗脱,实现了 O-去甲荷叶
碱、N-去甲荷叶碱、荷叶碱和莲碱四种生物碱的同时基线分离。在 -50 μg/mL 浓度范
围内,O-去甲荷叶碱(r = )、N-去甲荷叶碱(r = )、荷叶碱(r = )
和莲碱(r = )具有良好的线性关系,它们的检出限分别为 ng、 ng、
ng 和 ng (S/N = 3)。该方法具有良好的精密度和回收率,可用于荷叶中的生物碱
的快速测定。
关键词:荷叶;生物碱;定性分析;分离纯化;定量分析

1
荷叶生物碱的分析及分离纯化研究 
ABSTRACT
Nelumbo nucifera GAERTN (commonly known as lotus), one of the most well known ornamental and
economic perennial aquatic plants and now widely cultivated and consumed all over the world. Nelumbo
nucifera leaves is a kind of naturals plant material used both in food and medicine field, involving nutrients
and many biological activities. In order to further the study of biological activities of these aporphine
alkaloids and to control the quality of this traditional Chinese cash crops and their products, better analysis
and purification methods are urgently main results are indicated as follows:
1. A novel method for the analysis of alkaloids in Nelumbo nucifera leaves was established by
SPE-RRLC-Q-TOF. The crude sample was ex