文档介绍:华中科技大学同济医学院
硕士学位论文
白介素-8在新生鼠高氧肺损伤中的作用
姓名:张晓慧
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:常立文
白介素一谛律蟾哐醴嗡鹕酥械淖饔摘要华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科椒ň芊闻莨嘞词塞米松组,Ⅵ.高氧厝姿勺椤E嘌∈焙螅∩锨澹舛ㄈ酸脱氢酶活性·琇⒐’探讨新生大鼠肺泡巨噬细胞,头的白介素。,Ⅲ.在高氧肺损伤炎症反应中的作用机制。生鼠,接种、贴壁纯化后随机分为:,组,Ⅳ高氧组,:高氧组较空气组、高氧组较空组较高氧组明显增加;高氧厝姿勺榻细哐踝椤⒏液中含量:高氧组较空气组、高氧组较空气组均明显降低;高氧厝姿勺榻细哐踝椤⒏哐地塞米松组较高氧组均增加分别.,;空气组较空气组、高氧组较高氧组显著增加分别.,。赴翁癓导师张晓慧,,获取新气组明显增加分别.,;空气组较空气组、高氧华中科技大学同济医学院,硕士学位论文盻。。一\
可刺激释放儿一崾綢斡肓撕馐鼙ぃ在嬖谑保态,但钚栽诟髯橹渚尴灾圆钜臁3Щ活性改变:非高氧组细胞形态无明显改变,高氧各组细胞呈现生长不良状结论:鞘笾芊闻莨嘞匆褐蠭的重要来源,高氧暴露高氧可进一步刺激,增加头牛崾狙趿坪喜一杆菌感染时,由于一灾黾樱又亓朔嗡鹕耍高氧抑制活性氧释放,降低的抗菌活性,可能为氧疗时易发生感染的原因之一;。关键词:高氧白介素,活性氧肺泡巨噬细胞华中科技大学同济医学院硕士学位论文、
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白介素一谛律蟾哐醴嗡鹕酥械淖饔刚出,机械通气只是促进肺部损伤的因素之一,而炎症可能是闹饕纳龊图せ罾氩豢F淝骰图せ钜蜃拥淖饔谩T诒┞于高氧的动物模型和氧疗的患儿支气管肺泡灌洗液珺中,发现那骰钚栽黾印啊薄>」苷庵智骰活性的来源尚未完全明了,但目前认为,肺泡巨噬细胞来源的可能是高氧肺损伤炎症反应发生的始动机制。对于的治疗,常用的药物之一是地塞米松,但对于其疗效及作用机制仍有争论因此本实验以为模型,⒉』萍坝行У闹瘟拼胧随着极低出生体重儿的存活率明显提高,支气管肺发育不良日益成为人们关注的问题。尽管普遍认为姆⑸敫吲ǘ妊鹾突低ㄆ榷嘀忠蛩赜泄兀ń暧腥颂我们以前的实验也证明,高氧肺损伤急性期病理学改变为:以多形核白细胞,渗出为主要表现的弥漫性肺泡损伤,瞧渲匾@丛础置诙嘀諴趋化物,“吾华中科技大学同济医学院硕士学位论文‘
材料及方法分光光度计型虾5缱庸庋Ъ际跹芯克,觳馐约梁校暇┙ǔ缮锕こ萄芯克峁一噶C庖呶椒约梁校虾I劭萍际狄涤邢薰麻醉,浸泡于%酒精中消毒。将消毒过的鼠仰卧周定,颈部正中暴露气管,剪开一小口,插入导管并固定,向导管内缓慢注入无菌生理盐水,然后轻轻回抽,将灌洗液注入离心管内。重复灌洗危洗液汇集同一离心管中。及活力测定。然后将细胞浓度调整为一主要仪器及试剂数字式测氧仪,上海嘉定学联仪表厂生产远炕嫱济副暌牵戏缴窖б瞧鞑可倒置显微镜、嘌涞瘸9嬉瞧乳酸脱氢酶—诜肿安地塞米松,兴化制药厂生产:芊闻莨嘞,术:在无菌室内,将生后籰斓腟律蟾骨蛔⑸サ奈诶集于离心管中。混有血液的灌洗液弃去。按同样的方法操作,皇蠊赴炕灌洗液转离心分钟,吸弃上清,加入适量无血清培养液,吹打混匀,再次离心,弃上清,以去除残留的生理盐水。,留取少许做细胞分类计数痬又钟谝拦鶶公司产品琇⒐趸二方法:华中科技大学同济医学院碗士学位论文.
胞即为活力细胞,计算其所占比例。哐地塞米松组,Ⅵ.高氧厝姿勺椤I鲜鲎橹屑尤氲腖小时。培养结束时,测培养瓶内氧浓度。弃去氧浓度低于%的样本。取出培养液,离心,留取上清,测定钚浴阿笠含量。嘌锨逡褐形镏驶钚约昂坎舛ǎ释放到细胞外,使培养液中含量增加,常作为反映细胞损伤程度的指标。:是吞噬细胞杀菌作用中最重要的一种活性氧,用来反个培养瓶中,置嘌渲温度为。浓度为培养。小时后,弃去培养液,然后用培养液冲洗,贴壁细胞即为。细胞分类计数采用瑞氏染色法。具体方法为:涂片一晾干一染色分钟一冲洗一晾干一油镜下计数鱿赴扑鉇急壤细胞活力测定采用台盼蓝拒染试验法。操作方法为:取一滴台盼蓝染液,加九滴细胞悬液,混匀,静置三分钟,在光镜下计数细胞,未染色细赴肿榧芭嘌将贴壁纯化后的细胞加入新培养液,随机分为:掌椋琁哐组,掌脂多糖甃椋簦哐椋浓度为/,加入的地塞米松浓度为氧痬。各组均置于嘌渲。%,培养篖是位于细胞浆内