文档介绍：华东师范大学
博士学位论文
运动和黄芪丹参对大鼠骨骼肌线粒体生物发生的作用
姓名:赵婷婷
申请学位级别:博士
专业:运动人体科学
指导教师:丁树哲
20070401
中文摘要生过程中对疉信号转导逸路的影咿隋况。酶酃趸倍栽嘌线粒体足真核纲腱志麴能量转换器,不仅透过氧佬磷酸化生成⒃谙胞能量供给中起决定性в茫乖谏し⒂⒌蛲觥⑺ダ瞎讨谐缫W饔谩O粒体的生物发生主要指在一个细胞的牛命周期中线粒体的增殖、系统发生和个体发生过程。线粒体位线粒体基质,是由槌傻乃础闭环结构,含个基因,编码条多肽链,种和謗庑只能编码线粒体产生与合成所需蛋白总量的一小部分,其余蛋涵仍需核基因组编羁。因此,线粒体生物发生需要孩与线糖体基隧组的共同表达。蚕静有大篷研究表骥运动可促进线粒体生物发生,魍其分予机制仍不完全涛楚。以为主瓣魑5诙攀箍梢缘鹘诙嘀中藕抛5纪泛投嘀忠蜃拥淖饔茫虼搜芯吭动过程中产生的适最欠褡魑5诙攀褂盏枷吡L迳锓⑸欠袷枪锹肌耐力运动适应、运动能力提高、骨骼肌线粒体增殖的生化基础;以及这一基础是否是临床应用黄芪丹参治疗骨骼肌损伤和促疲劳恢复的治疗机制都有重要的现实意义。本研究的目的在于:教忠淮畏扌栽硕澳土υ硕笙吡L彖贩ξ锓⑸相关因子的时榴睦交亿,线粒体形态及酶学变化,以及在运动诱发线粒体生物发骨骼舰缨胞存活状态的影响,掇索过氧化氢在不同剂量及作用时间对线被体生物发生相关网子的影响,确定其体外最适作用剂量和体外最适作用时问杉し⑾粒体生物发生,义研烈⑾赴劳,从而了解以过氧化氢为主的韵粒体生物发牛相关因子的作用机制。教只栖卧虏魏停蛴斡灸土ρ盗吩谟导线粒体生物发生过程中的作用,研究黄苠丹参促进骨繇肌损伤修复、抗疲劳豹分子生物学梳制。本研究共分三令部分,研究方法及结论如下。一、运动对大鼠骨骼肌线粒体生物发生枫制的影响方法:⒁淮渭毙栽硕檠∮眯坌許笫唬婊治组:对照组组涸硕纯套组只;一次运动赢∈弊纽灰淮卧硕后弊组只;次运动慝小时缉组只;一次运动后时
组组只;一次运动后时组组K醒盗纷榻天适应性游泳,每天一次,每次灰院竺看斡小时,每天共计∈蔽R淮长时游泳运动屑浼涓种印、耐力训练组选用雄性大鼠只,随机分为椋憾哉兆组只;茏詈笠淮卧硕蠹纯套组只;茏后一次运动后∈弊组周最后一次运动后∈弊组茏詈笠淮卧硕弊唬周最后一次运动后/时组组只;茏詈笠淮卧硕弊弧K醒盗纷天适应性游泳,每天一次,每次灰院笄周每次游刻次;后苊看斡,每天危灿斡周。急性及耐力运动结束后,分别取各大鼠腓肠肌,检测线粒⒁谎趸:厦、超氧化物歧化酶琒钚裕坏缇导觳夤趋兰∠粒体;采用孀B际凳庇ü⑾吡L遄B家蜃覤.,⒑撕粑蜃樱达水平:猙椒ḿ毂健结果:⒁淮渭毙栽硕笸簿沧楸冉希汗趋兰∠吡L錍动后即刻、运动后、组明显升高:钚栽谠硕、组明显升高:钚栽谠硕蠹纯獭组明显升高。电镜结果表明,对照组肌原纤维间有大量骨骼肌线粒体,形态完整,嵴紧密且整齐。一次急性运动后组线粒体多大量堆积于细胞核周围和肌纤维问,形态多样,多数线粒体肿胀成球形,体积增加砸淮渭毙栽硕组为例杖诤希吡L逯间形成很多大的空隙,类似鬼影状。一次急性运动后骨骼肌水平在、槊飨陨撸籱水平在樯撸、槊飨越档停籒—水平在、组明显增加,在、橛忻飨越档汀A姿峄疉结果表明空白对照组未见谋泶铮组均有表达,且以、两组水平较高。组未检测到。体酶复合体、线粒体转录因子,活性在运在、槊飨栽黾樱籱,.,—,
、、灰⒛土υ硕笸簿沧楸冉希合吡L錍组明显升裹。电馈结果表明,醚力运动羼,线艨俸在腿纤维闻明显浓集,大小不在组明显增加,运动后组明摄下降;而在即刻组、、组明显降低;産岢脖砻骺瞻锥哉兆槲醇姿峄疉的表达,两跳、俊、组均有表达,且双、阶樗浇细摺结论:⒁淮渭毙栽硕澳土Φ髁房商岣咴硕指雌诖竺锕趋纉的承乎,这可链建运动通过增强姿岽克平,刺激疉通路级联放大反应,提逡骨骢腿抗缺氯水平,从而促进线粒体在生理水平范围内达到较高水平,促进线粒体呼吸功能。⒃硕蠊趋繽雖表达的时相性变化是由多因豢制约的,这有待进一步的研究揭示。⒃硕辗⑾吡L迳锓⑸腜,痬旁路是否还伴随月芬酝萁他旁路的调节作用还有待遂一步研究。⒈缌υ硕笛橹な礟。赡芾二、过氧铯氢对骨骼矾原代壤养绥鼹线粒体生物发生的影响橇箭方法:本研究中提取新生馊槭蠊趋兰∠赴性嘌⒂霉趸氢作为外源牲找虼碳は赴⑹约し⑾卟诓锓⑸T嘌墓趋胍细胞分四部分处理:④⋯邦分秘接于手哑窍赴至杨貌晃九ǘ鹊腍进行作用,浓度分别为:,址扯,癕,在作用后的、、、蠱觳猓虎奂尤、、占赴⑸杩瞻锥哉兆椋蠷提取和检测;③处理的细胞离心洗涤收集后,加入戊二醚进行电镜检测;④提取线粒体,进行酶活性在运动后各组均井高;活性在运动后、、殡蓄陨撸籗活性在运动后一,个别线粒体边缘模糊,但未见空泡。耐力运动后骨戳腿、组明显增加,运动后即刻组却明显下降:水平在、