文档介绍：选修3《现代生物科技专题》知识点总结专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DN***段的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DN***段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:,PCR(DNA聚合酶链式反应)扩增,若序列未知,可以建立一个包括目的基因在内的基因文库,从中找到我们研究所需的目的基因。第二步:形成重组DNA分子第三步::将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法和基因枪法将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化方法是:先用CaCl2处理大肠杆菌,增强大肠杆菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。第四步:,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第五步:(三):抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。::向目标基因中引入正常功能的基因,以纠正或补偿基因的缺陷,但缺陷基因仍然存在。专题2细胞工程(一)(原理):细胞全能性技术基础:植物组织培养全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>:,,获得愈伤组织(创伤组织)