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营养琼脂培养基使用说明.doc

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营养琼脂培养基使用说明.doc

上传人:feng1964101 2020/8/27 文件大小:19 KB

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营养琼脂培养基使用说明.doc

文档介绍

文档介绍:营养琼脂培养基使用说明营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基) 用途: 用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养,也可用于消毒效果测定(GB/-,GB/-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO标准)。原理: 蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;***化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。配方(每升):蛋白胨10g牛肉膏粉3g***化钠   5g琼脂15g ± 使用方法: 1、称取本培养基33g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。 2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠),充分振摇,即为1:10的均匀稀释液。依次做1:100,1:1000……稀释液。 3、根据对样品污染情况的估计,选择2—3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。 4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。 5、观察结果。 6、菌落计数方法: 做平板菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏,在计下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 7、菌落计数的报告: 选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落;如有不同来源的几条链,则应将每条链视为一个菌落计 A:稀释度的选择