文档介绍：中山大学
博士学位论文
禽传染性支气管炎病毒分子流行病学及其表面抗原S1蛋白的抗
原表位谱研究
姓名:李林林
申请学位级别:博士
专业:食品安全生物学
指导教师:毕英佐;曹永长
20100608
中文摘要株涞暮塑账岷桶被岬南嗨菩苑直鹪%.ズ%:李林林导师:毕英佐教授曹永长教授专业:食品安全生物学并对砻婵乖璖鞍椎目乖砦黄捉蟹治觯〉靡韵陆峁典型鸡胚病变。电镜负染结果可见典型的冠状病毒样病毒粒子,直径约值接近,。遗传进化分析表明,株毒株聚类形成鲋饕5幕蛐停狙芯康毒株中有株聚类于基因型⒒蛐虸突蛐虸,其中株与国内流行株和株聚类于基因型株与劾嘤诨蛐虸暧牍诜禽传染性支气管炎是由禽传染性支气管炎病毒鸬募Φ囊恢旨毙浴高度接触传染性疾病,主要引起鸡呼吸道、肾脏、生殖道、胃肠道等病变,常引发大肠杆菌等继发感染而提高鸡群的死亡率,给养鸡生产带来巨大损失,是严重危害世界养禽业的重大传染病之一。本研究对从华南地区分离到株局进行了基因序列的测定,以此为基础,对华南地区进行分子流行病学分析,狙芯糠掷爰瓴杉曰D系厍闕毒株,其中呼吸型株,肾型株。%分离株的第三代鸡胚尿囊液接胚后能引起。呼吸型株和肾型株在鸡胚和厦娌獾玫腅值和面繁殖,但都能在赴厦娣敝常⒉赴”洹;ù难罚:笮芯孔鲎急浮狙芯慷闕毒株进行了基因的序列测定。序列比对结果表明,
离株聚类于基因型攴掷胫暧胍呙缰杲叵刀冀显叮颐挥幸桓龆局被分离到的数量随着年份推移而出现增加的趋势,推测昙浠D系厍狙芯砍晒竦攴掷氲腎株的全基因组序列,其基因组全长和各个基因编码区均表现出与国内分离株最大的相似性。株ɑ鞍椎牧礁隽呀馕坏慊蚨季哂卸嗵蕴氐恪;诟鞲龌虮嗦肭南低撤⒂交叉约关键词:传染性支气管炎病毒、基因组、基因、遗传进化分析、蛋白表达、抗原表位谱、免疫鸡场没有出现新的优势流行毒株,现用疫苗有比较好的免疫保护作用。分析表明,.均与国内分离株亲缘关系最近。采用多种方法综合分析,预测到株和鞍追直鹩龊隹赡艿腂细胞抗原表位。将推导的株蛋白的氨基酸序列提交给甅,采用同源建模的方法,成功地预测出株蛋白的三维结构。狙芯拷獶闟蛐蛄不含信号肽骄治T长,前后的个片段,分别设计引物,构建表达载体,表达并纯化个蛋白片段。同时纯化株病毒,对芰銪痗小鼠进行蚊庖撸获得每次免疫后的多抗血清。以上述纯化的个蛋白片段作为抗原,斑点印迹检测每次免疫后的血清,看抗原抗体反应情况。结果出现了智榭觯不能与所有四次免疫后的多抗血清发生抗原抗体反应或反应很弱;反应水平始终保持稳定或比较稳定;反应水平随着免疫次数的增多而增高;反应水平随着免疫次数的增多而降低;反应水平突然由无增强到较高水平;反应水平先增高后降低。还检测到蛋白抗原表位谱的分布,随着免疫次数的增多,有从/糠向/糠肿R频那魇啤<觳獾絀表面抗原蛋白的赴咝钥乖表位主要分布于以下氨基酸位点区域:~~~~推测蛋白上赴咝钥乖砦黄追植挤段Ы峡砬曳稚ⅲ负趺挥姓季免疫优势地位的赴咝钥乖砦弧R陨辖峁狪俅擦餍刑氐闾峁┝艘恍分子佐证。禽传染性支气管炎病毒分子流病学及其表面抗原蛋白的抗原表位谱研究
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锄签名屯÷茛学位论文作者签锄毕学位论文作者签确讳日期:印啤石月寥日日期:加月原创性声明学位论文使用授权声明导师签名:\髟矿伊校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构遥交论文的电文进入学校图书馆、院系资料室被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,可以采用复印、:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包