文档介绍：琼脂糖凝胶电泳,这种现象称为电泳。区带电泳是在半固相或胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液,然后加电场,分子在支持介质上或支持介质中迁移。支持介质的作用主要是为了防止机械干扰和由于温度变化以及大分子溶液的高密度而产生的对流。凝胶电泳:由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。根据支持介质的材料:、掌握agarosegelelectrophoresis的原理(agar):又名琼胶、菜燕、冻粉从石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高聚物。琼脂糖(agarose)琼脂胶(agaropectin)(一)琼脂糖凝胶电泳的原理琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D--脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束,构成大网孔型凝胶。该凝胶适合于免疫复合物、核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化。(一),,故无拖尾现象。,孔径较大,可用来分离酶的复合物、核酸、病毒等大分子物质。,可直接或干燥成薄膜后进行染色。,:在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中,DNA分子的电泳迁移率与其分子量的常用对数成反比;分子构型也对迁移率有影响,如共价闭环DNA>直线DNA>开环双链DNA。当凝胶浓度太高时,凝胶孔径变小,环状DNA(球形)不能进入胶中,相对迁移率为0,而同等大小的直线DNA(刚性棒状)可以按长轴方向前移,相对迁移率大于0。(二)琼脂糖凝胶电泳的应用质粒DNA限制性酶切图谱的分析;DNA限制性酶切图谱的分析;PCR产物的分析;纯化特定的DNA片段;(三):分子大小、电荷多少、颗粒形状和空间构象双链DNA分子迁移的速率与其分子量常用对数近似成反比PlasmidDNAI型(),II型(单链开环OC),III型(线性L)。I型III型(argrose,PAGE):浓度越低,相同核酸分子迁移越快;:低电压时DNA片段迁移率与所用的电压成正比。:TAE,TBE,TPE