文档介绍：FTO基因与中国儿童肥胖病遗传发病机制的相关性徐海冬,桑艳梅,闰洁,朱逞,(肥胖组),健康对照组选自无血缘关系的成年健康献血员183例。选取FTO基因9个具有单核甘酸多态性的位点,运用飞行质谱技术对FTO基因与中国儿童肥胖病的遗传易感相关性进行研究。结果在本课题所研究的FTO基因9个单核苷酸多态性与儿童肥胖病遗传易感性存在统计学相关性(P<)。结果得到FTO基因中rs、rs、rs、rsl、rs位点与中国儿童肥胖病发生相关;FTO基因的CTGGTCTGG、TCTGCAAAA、TGG单体型与儿童肥胖病发生相关。关键词:肥胖症;遗传性;基因;儿童;FTO基因随着现代分子生物学技术的迅速发展,人类对肥胖发病机制的认识和研究更为深入,已经发现了解耦联蛋白2基因(UCP2基因)、脂肪含量和肥胖相关基因(FTO基因)、促黑激素皮质素受体4基因(MC4R基因)等多种与肥胖相关的易感基因;2007年;Frayling等人利用全基因组扫描关联研究(GWAS)对一个大样本的英国肥胖和患有2型糖尿病的人群进行正常染色体的单核苷酸多态性(SNP)分析,率先报道了位于FTO基因第1内含子的rsT/A多态性与***和儿童肥胖病具有高度相关性。之后在多人种中进行的后续研究发现FTO基因与肥胖病的遗传发病机制存在统计学相关性。本课题选取中国儿童肥胖病患者201例作为研究对象,运用飞行质谱技术,对FTO基因的rs、rs、rs、rsl、rs、rsl、rs、rs、rs位点的多态性与中国儿童肥胖病的相关性进行研究,以期揭示FTO基因与中国儿童肥胖病遗传发病机制的相关性。,1,1引物设计利用SequenomMassARRAY@分子量阵列平台的iPLEXGOLD技术根据SNP位点序列信息设计多重反应PCR和单碱基延伸的引物,,按照其建议的PCR条件进行多重应PCR。PCR反应体系(384孔PCR板+38%的试剂损耗):¨L水,,,53trLdNTP,530pLPCR扩增引物混合物,106IxLTaq酶,1lxLDNA样本(每孔)。PCR反应条件:94℃预变性15min;94oC变性20s,56oC退火30s,72℃延伸1min,共45个循环;最终72℃延伸3rain,4℃保存。,避免影响单碱基延伸终止反应。,将常规PCR反应中的dNTP换为ddNTP,按照iPLEXGOLD建议的PCR条件进行单碱基增。(MALDI-TOF-MS)样品分析样品树脂纯化后,(Sequenom)点取纯化产物转入SpectroCHIP(Sequenom)芯片上,并用MALDI—。应用飞行时间质谱仪,自动采集数据,进行数据分析。