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蛋白质定量测定.ppt

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蛋白质定量测定.ppt

上传人:2623466021 2020/9/18 文件大小:1.35 MB

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文档介绍

文档介绍:实验一蛋白质的定量测定——Folin-酚试剂法(Lowry法)实验室规则一、学生必须服从老师的指导,按照实验目的、要求和方法做好充分准备,进行实验。二、保持实验室内安静、整洁,有秩序地进行工作。三、按照操作规程(规则)进行实验,正确地据实将实验数据等情况填写在规定的记录本上。四、节约实验材料和水电,按规定的数量取用原料和试剂。五、爱护仪器设备,实验完毕时,负责清洗干净,并按规定要求存放原处;仪器设备如有损坏,应立即报告老师,同时向管理人员说明情况,按规定办好报损或赔偿手续。六、实验室内严禁吸烟,不准带入食品,不准会客。七、不遵守实验室规则的应给予批评教育;对于严重违反操作规程并造成重大损失者,除赔偿损失外,并视情节轻重给予必要的纪律处分,直至追究法律责任。实验报告的书写实验报告是对实验结果的科学总结。书写实验报告是培养和提高文字表达能力及概括综合分析问题能力的重要训练方法。每次实验后要求写好实验报告。实验报告的书写要求结构完整、条理分明、文字简炼、书写工整、措词推理符合科学性、逻辑性。具体格式如下:::是实验报告的重要部分,一般要列出经过归纳整理的结果,并将实验数据列表说明,若为图形资料,应做好标记及剪贴。:要针对实验中所观察到的现象与结果而言,注意不要离开实验的实际去空谈理论或照抄书本。要判断结果是否为预期的,属于非预期的,要认真分析原因。1学****Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法。2制备标准曲线,测定未知样品中蛋白质含量。一目的要求二原理 、—酚试剂法(Lowry法)微量凯氏定氮法含氮有机物与浓硫酸共热时,其中的碳、氢二元素被氧化成二氧化碳和水,而氮则变成氨,氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。此过程通常称为“消化”。强碱使硫酸铵分解游离出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此过量酸液中和的程度,计算样品的含氮量。-,相对误差应小于2%。紫外分光光度法蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。紫外吸收法在蛋白质含量20-100µg/ml内服从比尔定律。双缩脲法在碱性条件下,具有两个以上肽键的物质能与双缩脲试剂的铜离子(Cu2+)作用,形成紫色络合物(该物质的分子结构式见图),颜色深浅与肽键的多少即蛋白质含量成正比。