文档介绍：实验六微生物的接种、分离和培养一、、分离基本技术的原理及操作要领。、分离的无菌操作过程。。。二、。根据不同的目的可采用的不同的接种方法,如平板划线法、斜面划线法、浸洗法、涂布法、倾注法、穿刺法、点植法和影印法。,采用各种方法从含菌样品中获得由单一个体(如单一菌体或孢子)或一段菌丝生长繁殖形成的微生物群体的过程。常用的分离方法有:平板划线法、稀释涂布平板分离法、稀释倾注平板分离法和单细胞分离法。平板分离法的基本原理包括两个方面:(1)选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养、酸碱度、温度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。(2)微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。值得指出的是从微生物群体中经分离生长在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养。因此,纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列的分离与纯化过程和多种特征鉴定方能得到。,在一定条件下生长繁殖的过程,分需氧培养法和厌氧培养法。本实验所做的需氧培养法,是采用生化培养箱和恒温摇床进行的。。平板菌落特征、斜面和液体培养特征、半固体穿刺培养特征等培养性状,是鉴定微生物的重要形态学依据。菌落是由单个或少数细胞在固体培养基表面或里面生长繁殖所形成的内眼可见的子细胞群体。菌落形态会因菌种不同或菌种相同但所用培养基、培养温度和时间等条件不同而存在不同程度的差异。若所用培养基、培养温度和时间等条件相同,则同一种菌所形成的菌落形态具有相对的稳定性和专一性。三、(Escherichiacoli),枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),金黄色葡萄球菌(usaureus),啤酒酵母(haromycescerevisiae),热带假丝酵母(Candidatropicalis),毛霉(Mucorsp.),根霉(Rhizopussp.),黑曲霉(),青霉(Penicilliumsp.),混合菌液。,半固体营养琼脂直立柱,PDA斜面和平板。,接种针,涂布棒,无菌吸管等。,生化培养箱等。四、实验方法与步骤(一)实验项目接种前的准备:接种的试管、培养皿等应做好标记,注明菌种的名称,日期、接种者等。表6-,并负责掀开皿盖;右手持接种环,取菌后在平板上划线。,菌种管在外侧;右手持接种环,取菌后参照图7—1在斜面上划线。→→垂直由下而上扦入半固体培养基内→、根霉PDA各一皿取少许菌→分点点在斜面或平板上实验项目所用菌种所用培养基方法提示名称用量黑曲霉、,并负责开启皿盖,右手持接种环,取菌少许后在平板上作分区划线。℃的融化琼脂,→用灭菌涂布棒涂开涂匀(二)各种接种方法的操作步骤所有待接种的培养基在接种前都要先贴好标签,整个接种过程都必须在酒精灯旁进行。。具体操作如下:(1)操作前,先用75%酒精擦手,待酒精挥发后才能点燃酒精灯。(2)用斜面进行接种时,将原菌种管和待转接斜面试管夹在左手的大拇指和其它四指之间,斜面朝上,并处于水平位置。(图6-1,1)123456图6-1斜面划线接种示意图(3)先将原菌种管和待转接斜面试管的硅胶塞旋转一下,以便接种时便于拔出。(4)右手拿接种环(与日常拿笔一样)在火焰上将环金属丝部分烧红灭菌,然后将其余要伸入试管部分的金属柄也反