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SsNHXI基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性的研究 (1).pdf

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文档介绍

文档介绍:⑧凰脚基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性东北知予荭大雪博士学位论文研究研究生学号:——学校代码:—级:玉东北师范大学学位评定委员会月分类号:密‘作者:李望丰指导教师:刘立侠教授学科专业:植物学研究方向:植物基因工程:
学位论文作者签名:查翌生白期:丝:』兰电话:——邮编:——学位论文作者签名:硅塑垒指导教师签名:当謇萑期:迦:独创性声明学位论文版权使用授权书期:旌荩骸辍荩尹日本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得东北师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解东北师范大学有关保留、使用学位论文的规定,即:东北师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权东北师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文作者毕业后去向:工作单位:日,通讯地址:
位点,窘换槐;和液泡膜型疘嫦蜃T说鞍膜型跄嫦蜃T说鞍谆虻既胲俎;蜃橹小咏恢な涤个独立转摘要猪毛菜液泡膜型跄嫦蜃T说鞍兹ɑ鵞蛄腥ǔの基酸残基。液泡膜型跄嫦蜃T说鞍椎母叨缺J厍种萍涟甭冗拎弘呓岷的提高,充分验证了该基因抗盐功能。总之,基因是液泡膜型螅跄验。×艘泡膜型疘逆向转运蛋白全基因序列,构建了该基因的植物表达载体并转化紫花苜蓿,并对获得大量转基因苜蓿材料进行了耐盐性研究。包含一个长度为的开放阅读框琌嗦个氨特有的段跨膜疏水结构域在蛋白序列中被发现。氨基酸序列多重比对分析表明,该蛋白与来自盐爪爪、北滨藜⒆匣ㄜ俎⒚藁⒛饽辖⑺⒋舐和玉米囊号菽ば蚇逆向转运蛋白相比,相似性分别达到了%,%,%,%,%,%,%和%。进化树分析表明,该蛋白与其他液泡膜型疕嫦蜃T说鞍浊自倒叵到近,而与质膜型疕嫦蜃T说鞍浊自倒叵到显丁T谝号菽ば蚇/逆向转运蛋白中,、北滨藜亲缘关系较近,而与甜土植物亲缘关系较远。该基因在酵母中表达能够提高酵母的生长速率,在烟草中表达能够有效的提高代转基因种子在含盐培养基中的发芽率,并且生物量和株高都比对照有明显向转运蛋白基因家族的一个全新成员,同时,在植物中过表达此基因能够明显的提高转基因植株的耐盐碱能力。苜蓿的基因型是影响苜蓿遗传转化的关键因素,只有很少的栽培品种适合建立高效的再生体系。本研究以份国内外主栽品种作为供试品种,通过比较品种间的诱导能力,筛选到公农盼W罴训幕蛐汀T诖嘶∩希怨号的嫩叶为外植体,建立了一套高效的农杆菌介导苜蓿遗传转化体系,成功将猪毛菜液泡化系为转基因阳性株系,最终获得了暄粜灾仓辍本研究以来自独立转化系的苜蓿植株作为耐盐试验材料,进行盐胁迫试稻,
猪毛菜液泡膜型棠嫦蜃T说鞍谆虻谋泶锬馨镏;蛑参锏挚寡涡财龋;液泡模型つ嫦蜃T说鞍谆境胁迫启动子调控下,随着盐处理浓度的增高而表达量也逐渐增高。耐盐试验表明,与对照相比转基因植株具有明显耐盐能力,最高耐盐能力达至,而对照在的条件下逐渐死亡。并且转基因耐盐植株中具有更高,的含量。生理分析表明,在盐胁迫条件下,转基因耐盐植株受到的伤害要比对照植株轻的多。转基因植株的超氧化物歧化酶钚员浠魇菩『透彼岷吭龀幅度小,另外,转基因植株的相对电导率浠步闲。庑┥硎荼砻鳎有效的提高了转基因植株的耐盐能力。关键词:基因克隆;耐盐能力;;农杆菌介导遗传转化;紫花苜蓿
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目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯选题背景、目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..√獗尘啊骸.√⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯..!⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯.;;芯拷埂第二章猪毛菜液泡膜疕嫦蜃T说鞍谆虻目寺『头肿由镄畔⒀Х治’;匹:。■‘,‘.
引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..。⋯⋯⋯⋯⋯⋯.材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..