文档介绍：安徽农业大学
硕士学位论文
地衣芽孢杜菌发酵豆粕的研究
姓名:刘海进
申请学位级别:硕士
专业:动物营养与饲料科学
指导教师:李吕木
2011-06
摘要
地衣芽孢杆菌 D-1 是安徽农业大学饲料科技研究所分离的一株饲用微生物,为了
实现地衣芽孢杆菌 D-1 的工业化生产,对该菌株的液态产碱性蛋白酶培养条件、工业
培养基配方和固态发酵豆粕的发酵条件进行了优化研究,并用该菌的固态发酵豆粕替
代豆粕饲喂产蛋鸡,比较其对蛋鸡生产性能、蛋品质及血清生化指标的影响。
试验 1:地衣芽孢杆菌 D-1 产碱性蛋白酶培养条件的优化。为了对产碱性蛋白酶
4
的地衣芽孢杆菌 D-1 的培养条件进行优化,利用 10L 发酵罐,采用正交设计 L9(3 )
试验设计,对培养温度,pH 值,搅拌转速和通气量 4 因素进行优化,得到地衣芽孢
杆菌 D­1 发酵产碱性蛋白酶的最优培养条件为:培养温度 ℃,pH 值 ,通气量 
4L/min,搅拌转速 300r/min。利用最优条件组合进行验证实验表明,该培养条件下地
衣芽孢杆菌 D­1 碱性蛋白酶的酶活为 。
试验 2:地衣芽孢杆菌 D-1 培养基的优化。为了优化地衣芽孢杆菌 D-1 菌株的培
养基成分,以培养基各组分对菌体生长的影响作为考察指标,先采用单因素,确定最
3
佳的碳源,氮源和无机盐源,后采用正交设计 L9(3 )试验设计,对地衣芽孢杆菌 D-1
的培养基主要成分进行分析和优化,得到地衣芽孢杆菌 D-1 优化的最佳培养基配方
为:以 %麸皮作为碳源,以 2%豆粕粉作为氮源,以 % KH2PO4 作为无机盐源,
250mL 三角瓶装液量 100mL,接种量 5%,培养温度 37℃,初始 ,培养 24h,活
菌数最高,达到 ×10 12cfu/mL。
试验 3:地衣芽孢杆菌 D-1 发酵豆粕发酵条件的优化。为了优化地衣芽孢杆菌 D-1
5
发酵豆粕的发酵条件,以普通膨化豆粕为原料, 采用 L1(46 )正交试验设计, 用 500mL
三角瓶进行好氧固态发酵试验,研究接种量、料水比、发酵时间、装料量和发酵温度
5 因素对发酵豆粕中酸溶蛋白含量、胰蛋白酶抑制因子、碱性蛋白酶酶活、中性蛋白
酶酶活及脂肪酶酶活的影响。结果表明, 以酸溶蛋白增加量为目标的最优发酵条件为:
接种量 7%,料水比为 1:1,发酵时间为 58h,装料量为 60g,发酵温度为 39℃,发酵
后酸溶蛋白含量(占风干样)为 %;以胰蛋白酶抑制因子降解效果为目标的最
优发酵条件为:接种量为 3%,料水比为 1:,发酵时间为 48h,装料量为 55g,发
酵温度为 33℃,发酵后胰蛋白酶抑制因子的含量为 ;以碱性蛋白酶酶活为
目标的最优发酵条件为:接种量 7%,料水比为 1:,发酵时间为 43h,装料量为 55g,
I
发酵温度为 33℃,发酵后碱性蛋白酶酶活达到 ;以中性蛋白酶酶活为目标
的最优发酵条件为:接种量 9%,料水比为 1:,发酵时间为 58h,装料量为 55g,
发酵温度为 35℃,发酵后中性蛋白酶酶活达到 ;以脂肪酶酶活为目标的最
优发酵条件为:接种量 9%,料水比为 1:,发酵时间为 48h,装料量为 55g,发酵
温度为 33℃,发酵后脂肪酶酶活达到 。地衣芽孢杆菌 D-1 发酵豆粕不仅提
高了酸溶蛋白的含量和消化酶的含量,而且能明显降解抗营养因子,从而改善豆粕的
饲用品质。
试验4:不同类型发酵豆粕饲喂产蛋鸡的应用研究。研究添加不同类型发酵豆粕
对产蛋鸡生产性能、蛋品质及血液生化指标的影响。试验选取29周龄海兰蛋鸡324只,
随机分成3组,每组设3个重复,每个重复36只鸡,分别饲喂基础日粮(对照)、高酸
(试验1组)、低胰蛋
(试验2组),
试验期42d。结果表明,与对照组相比,试验1、%%,
差异均极显著(P<),%%,差异均显著( P<),
%,差异显著(P<), 但对蛋重和蛋品质无显著影响(P
>);试验1、2组的IgA、IgM、IgG、碱性磷酸酶和总蛋白均有不同程度的提高,
而尿素氮,血钙和血磷均有不同程度的降低;试验1组和试验2组