文档介绍：杞菊地黄丸(浓缩丸)的质量分析实验仪器: 锥形瓶、 5ml 量瓶、 50ml 量瓶、量筒、高效液相色谱仪、 UV 2101P C 紫外可见分光光度计、超声波振荡仪、紫外二极管阵列检测器、 0. 45μ m 微孔滤膜、紫外灯实验试剂: 甲醇、甲酸、甲苯、***、乙***、乙酸乙酯、***、二***甲烷、浓氨试液、重蒸馏水( 临用前制备)、冰醋酸、环己烷、水饱和正丁醇、 % 磷酸溶液、 % 磷酸溶液、盐酸盐 5% 三***化铁乙醇溶液、 5% 硅钨酸乙醇溶液、 % 的2 ,2- 二苯基-1- 苦肼基无水乙醇溶液、 10% 硫酸乙醇溶液、三***化铝试液、 10% 磷钼酸乙醇溶液、 2% 香草醛硫酸乙醇溶液、十八烷基硅烷键合硅胶、中性氧化铝、 PhenomenexC 18、硅胶 G 薄层板、硅胶 H 薄层板、聚酰***薄膜、实验样品: 马钱苷对照品、丹皮酚对照品、知柏地黄丸( 浓缩丸)、缺牡丹皮的杞菊地黄丸( 浓缩丸)、 23- 乙酰泽泻醇 B 对照品、毛蕊花糖苷对照品、熊果酸对照品、绿原酸对照品、枸杞子对照药材、菊花对照药材、落新妇苷对照品、山药对照药材、一、酒萸肉和牡丹皮的含量测定( 1) 酒萸肉( 酒萸肉又叫山茱萸, 本品主要使用为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉, 酒萸肉提取物中主要含莫诺苷、马钱苷等成分。) 方法 1 照高效液相色谱法( 2015 年版药典一部附录Ⅵ D )测定 1 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇—乙***— % 磷酸溶液( 5: 9: 86) 为流动相; 检测波长为 236nm 。理论板数按马钱苷峰计算应不低于 4000 。 2 对照品溶液的制备取马钱苷对照品适量,精密称定,加 50% 甲醇制成每 1ml 含 40μ g 的溶液,即得。 3 供试品溶液的制备取本品适量,研碎,取约 1g ,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 50% 甲醇 25ml ,密塞,称定重量,加热回流 1 小时,放冷,再称定重量,用 50% 甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 精密量取续滤液 10ml ,加在中性氧化铝柱( 100 ~ 200 目, 4g ,内径为 1cm )上, 用 40% 甲醇 50ml 洗脱,收集流出液与洗脱液,蒸干,残渣用 50% 甲醇溶解, 转移至 5ml 量瓶中,加 50% 甲醇至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液,即得。 4 测定法分别精密吸取对照品溶液 10μ l 与供试品溶液 5~ 10μ l, 注入液相色谱仪,测定,即得。本品每 1g 含酒萸肉以马钱苷( C 17H 26O 10 )计,不得少于。方法 2 RP -HP LC 法对杞菊地黄丸( 浓缩丸) 中马钱苷进行含量测定 1、色谱条件色谱柱: Dia mo nsil -C 18( 250 mm × mm, 5μ m) ; 流动相: 乙***- 甲醇-0. 1% 磷酸溶液( 10∶ 5∶ 85) ,( 流动相对样品测定影响较大建议尝试四氢呋喃- 乙***- 甲醇(1∶ 8∶ 4)- 0. 05% 磷酸溶液比较) ;流速:1 mL/mi n, 检测波长: 236 n m, 柱温: 室温( 柱温仅对保留时间有影响, 对样品分离无影响, 考虑到出峰时间,有的选择柱温为 40 ℃,与 2010 年版《中国药典》一部一致。) 理论板数以马钱苷峰计算, 不低于 4 000 。 2、线性范围测定波长的选择取马钱苷对照品溶液, 在含量测定条件下, 以 HPLC-DAD 法进行紫外光谱全波长扫描测定, 得到紫外吸收光谱图, 最大吸收波长为 238 nm , 参考《中国药典》 2015 年版一部明目地黄丸酒萸肉含量测定项下的检测波长, 最后确定测定波长为 236nm 精密称取马钱苷对照品 12. 42 mg ,置 50 mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品储备液, 分别吸取对照品储备液 1, 3, 5, 7, 10 ml置 50 ml 量瓶中,加 85% 甲醇至刻度, 分别进样 20 μL,在 236nm 测定其峰面积, 以峰面积为纵坐标, 对照品进样量为横坐标, 绘制标准曲线。求回归方程(参考结果: Y=1 033 962. 149X+3 383. 116, R=0. 999 6。试验表明, 进样量在 0. 090 0~ 0. 900 μg 范围内, 马钱苷峰面积与进样量有良好线性关系。) 重复性试验分别精密称取同一批号样品 6份,用 6 个测定结果进行评价。按样品测定项下的方法进行测定。( 参考结果其平均含量为 1. 17 mg /g,R SD为 1. 1%, 表明重复性较好。) 稳定性试验考察对照品溶液、供试品溶液的稳定性。精密吸取对照品溶液、供试品溶液 10