文档介绍：缓冲溶液配制和性质、溶液pH值测定【试验目标】学****缓冲溶液及常见等渗磷酸盐缓冲溶液配制方法。加深对缓冲溶液性质了解。强化吸量管使用方法。学****使用pHS-2C型酸度计。培养环境保护意识。【预****作业】通常性溶液和缓冲溶液有什么不一样?缓冲溶液性质有哪些?怎样衡量缓冲溶液缓冲能力大小?缓冲溶液缓冲能力和什么原因相关?试验是怎样设计以验证缓冲溶液所含有性质及缓冲容量影响原因,设计时有哪些注意事项?该怎样检测缓冲溶液pH值是否发生改变?是否均需要用pH计?本试验属定量测定还是定性测定或半定量测定?【试验原理】一般溶液不含有抗酸、抗碱、抗稀释作用。缓冲溶液通常是由足够浓度弱酸及其共轭碱、弱碱及其共轭酸或多元酸酸式盐及其次级盐组成,含有抵御外加少许强酸或强碱、或合适稀释而保持溶液pH值基础不变作用。本试验经过将一般溶液和配制成缓冲溶液对加入酸、碱或合适稀释前后pH数值改变来探讨缓冲溶液性质。依据缓冲溶液中共轭酸碱对所存在质子转移平衡:HB⇌B-+H3O+缓冲溶液pH值计算公式为:式中pKa为共轭酸解离常数负对数。此式表明:缓冲溶液pH值关键取决于弱酸pKa值,其次决定于其缓冲比。需注意是,由上述公式算得pH值是近似,正确计算应该用活度而不应该用浓度。要配制正确pH值缓冲溶液,可参考相关手册和参考书上配方,它们pH值是由正确试验方法确定。缓冲容量(β)是衡量缓冲能力大小尺度。缓冲容量(β)大小和缓冲溶液总浓度、缓冲组分比值相关。缓冲溶液总浓度越大则β越大;缓冲比越趋向于1,则β越大,当缓冲比为1时,β达极大值。试验室中最简单测定缓冲容量方法是利用酸碱指示剂变色来进行判定。比如:本试验就使用了***红指示剂。表2-3-1***红指示剂变色范围pH值<~>(等渗磷酸盐缓冲盐水)作为体外细胞缓冲培养液。PBS是和人体血浆渗透压(280~320mOsmol·L-1)等渗,并和人体血液pH值(~)一致含有NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等物质磷酸盐缓冲液。依据不一样用途,PBS有不一样配制方法,如用于细胞培养pbs配方为:8gNaCl,,,,加水至800ml,,补水至1L,消毒灭菌既得。其在水溶液中质子转移平衡以下:H2PO4-+H2O⇌H2PO42-+H3O+Ka2由上式可知该缓冲液pH计算公式为该公式计算出来数值因为未考虑溶液活度,所以所得数值仍为近似值。【仪器和试剂】仪器:吸量管(5mL×5,10mL×5),比色管(20mL×4),量筒(10mL),烧杯(50mL×6),试管(10mL×6,20mL×6),滴管,玻棒,洗瓶,pHS-2C型酸度计等试剂:·L-1HAc,·L-1HAc,·L-1NaAc,·L-1NaAc,·L-1KH2PO4,·L-1Na2HPO4,·L-1NaCl,·L-1KCl,·L-1NaOH,·L-1HCl,·L-1HCl,蒸馏水,***红指示剂,广泛pH试纸,自带试样两份【试验步骤】(方法1)一、缓冲溶液配制根据表2-3-2中用量,用吸量管配制甲