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草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP7核酸疫苗的研究.pdf

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草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP7核酸疫苗的研究.pdf

上传人:你是我的全部 2014/5/28 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:艚教师虢傅纾。学位论文作者签名:玲哿袭学位论文作者签名:徐彳寻嶷期:期:知学位论文独创性声明学位论文使用授权声明期:椤⑸稀⒚本人郑重声明:所提交的学位是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。本论文中除引文外,所有实验、数据和有关材料均是真实的。本论文中除引文和致谢的内容外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属南京师范大学。学校有权保存本学位论文的电子和纸质文档,可以借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容,可以采用影印、复印等手段保存、汇编本学位论文。学校可以向国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅。C苈畚脑诮饷芎笞袷卮斯娑保密论文注释:本学位论文属于保密论文,保密期限为年。日
摘要仅感染草鱼,而且还感染青鱼、麦穗鱼以及某些海水鱼等养殖鱼类,对淡水养殖业造为立体对称的面体球形颗粒,由诵暮投嗖阋驴内壳层、中第片段编码,己被揭示其在病毒感染及致病过程中起着不可替代的作用,并且具有较好的抗原性。蚔抗体都能与抗原中和,且目固逯泻突钚制备和运输方便等优点,大大克服了灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗等所存在的缺陷,已引起行业内的广泛关注。护实验。实验设三个重组基因疫苗一.—剂量组,注射剂量分别为峙、“耄赵靥遄樽⑸鋚草鱼是我国淡水养殖的主要品种之一。长期以来,草鱼出血病⒉÷式细撸劳雎矢叽ヒ陨希草鱼呼肠孤病毒,驯恢な滴2萦愠鲅2〉牟≡隶属呼肠孤病毒科,水生呼肠孤病毒属,是中国分离鉴定的第一株鱼类病毒,也是水生呼肠孤病毒属中致病力最强的毒株。主要侵染于草鱼肝脏、心脏、肌肉、肾脏、脾、鳃、肠道等活的组织细胞内,导致化学药物难于达到治疗效果,已成为草鱼养殖发展中的“瓶颈”问题。不成了严重的危害。间层与外壳层槌桑浠蜃槲醴纸诙蔚乃碦。近几年,基因序列分析和三维结构研究表明,成熟的颗粒由衣壳蛋白~组成,其中蚔为病毒外衣壳组分,鞍资怯是倍,表明赡苁荊饕5目乖龆ù兀蠽基因的重组质粒又可成功转染到真核细胞中,使研制基因疫苗成为可能。核酸疫苗,又称基因疫苗或呙纾峭ü蚬こ谈脑斓腄注入机体后产生免疫应答来防治疾病一种新型疫苗。具有抗原性强、保护时间长、安全性好、,同时将另一拷贝的蛑糜诟俗床毒多角体蛋白基因启动子控制之下,构建蚝怂嵋呙绫泶镌靥—猇。初步开展了核酸疫苗的免疫效果以及对草鱼出血病的免疫保甮,对照组不注射任何疫苗。免疫后第、、、、天对草鱼进行尾静脉取血,通过—觳夂怂嵋苗的体内转录情况,问接凝集反应测定抗体水平,第天攻毒试验来检测各组的免疫保护效果。结果显示,重组质粒—猇甐既胗闾搴螅琕基因在肌动蛋白启动子的驱动下持续表达,至第天仍能检测到目的基因的转录。各免疫
的免疫作用和免疫保护效率,为草鱼呼肠孤病毒核酸疫苗的生产应用和产业化提供了组均有抗体产生,抗体效价在第天检测时达到最高,¨亮孔槁愿哂谄渌量组;攻毒试验计算注射疫苗各组死亡率分别为ァ%和ィ赵靥遄楹投哉兆榉别为%和ァ实验结果表明,构建的一籚籚萦愫舫虏《竞怂嵋呙缇哂薪虾一定的理论依据。关键词:草鱼呼肠孤病毒:怂嵋呙纾籇一肌动蛋白启动子摘要
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目录一,~,~,一一一姐~鯻■■⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.虻腡载体克隆与鉴定⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第滦髀邸草鱼出血病的流行病学和病原研究⋯⋯草鱼呼肠孤病毒的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯.《窘峁寡芯俊.《镜鞍准懊庖咝匝芯俊.《镜募觳狻草鱼出血病免疫防治研究进展⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯...怂嵋呙绲墓菇ㄓ胱饔没怼第履康幕騐的扩增、克隆与鉴定⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一虻睦┰觥实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯~虻睦┰鼋峁虻腡载体克隆及测序结果讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯..第履康牡鞍譜免疫原性的研究⋯⋯⋯。一. . 一........................................................删蒻
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