文档介绍:第六章
实验中医学常用的
实验研究方法
及其在中医研究中的应用
许多初涉中医实验研究的人,最大的问题是不知道如何着手研究,不知道观察什么指标。
比如,发现某张中药复方治疗肿瘤,比如肝癌,有效,打算开展实验验证其疗效,揭示其作用机制,怎么办?从何入手?
你们说怎么办?如何开展研究,实施具体步骤?
本章介绍实验中医学的常用实验方法和技术,以及应用这些方法研究中医的典型范例。
希望通过集中对常用具体实验方法的介绍,让大家了解不同学科主要方法、异同,各自的特点和优势,以及相互间的联系,学会如何根据需要选择不同的方法或不同方法的组合。
各节中的研究现状和范例,希望对如何应用具体某一实验手段研究中医有比较具体的认识,通过典型范例的介绍分析,使这种认识更加深化。
在实验研究中可以观察许多方面,看看中药治疗后在哪些方面起作用。其中形态学是最常用的观察手段。即使在分子生物学迅速发展的今天,也是如此。有许多优点,实在。比如中药的药效学实验、毒理实验、质量检测等往往采用这些实验。
形态学方法大体有3个层次:大体解剖、光镜、电镜。
大体解剖:肉眼所见,最为基本。如果肿瘤体积在用了中药后,没有减小,再什么先进的研究也没有必要。临床所见也大体如此,比如咳嗽好了没有,骨头接上了没有。这些最基本。
但是,想深入细致地看,难。肉眼能力的局限。放大镜放大的倍数仅若干倍。所以就必须借助光镜和电镜。
光镜:通常可以放大100-400倍(范围在50-1600倍)。由于放大,所以要求组织经过处理,最常见的是石蜡包埋、切片、染色。
电镜:通常可以放大500-10000倍。由于放大倍数太大,石蜡切片还不能满足,所以要求特殊的包埋、切片、染色技术。
第六章第一节
解剖学方法及其
在中医研究中的应用
解剖学是一门研究机体形态结构的重要医学基础学科,属于生物学中的形态学范畴。根据其研究对象及研究方法的不同,可分为大体解剖学、组织学和胚胎学三部分。
大体解剖学是指用刀剖割,用肉眼观察机体各器官的形态结构的科学,根据具体研究方法和观察内容的不同,又将其进一步分为系统解剖学和局部解剖学。
系统解剖学主要按照机体各系统来叙述各器官的形态结构。
局部解剖学是按照机体自然分区如头、颈、胸、腹、四肢等叙述各器官结构的层次排列、毗邻关系、血液供应、神经支配、体表标志和体表投影。
(第2-3段讲解剖学发展史,建议自学。)
大体解剖学在医学中占有极其重要的地位。
大体解剖学不仅是一门重要的医学基础学科,是学习其他基础医学和临床医学课程的基础,同时也是研究其他生命科学不可或缺的一种重要的手段。
虽然,解剖学是一门经典的学科,但是在今天医学实验中还一直在运用,不仅在医学基础、临床医学,就是在实验医学,这样的技术也十分重要。
学生在教学实验中,往往表现出对实验动物的脏器结构位置不清楚,找不到胃;解剖手法不对,损伤组织结构;技术不熟练等等。
一、大体解剖学的主要方法
标本防腐固定剂常用者为10%左右的福尔马林(甲醛)。常用的防腐固定方法是先灌注,后浸泡。
在动物实验中,有时为了保证组织的新鲜,也采取类似方法。比如,将小鼠等实验动物麻醉,开胸,左心室插入针头,缓慢注入固定液,同时切开右心房,让血液和固定液流出,待动物组织变硬后(当然得参照具体实验方法),终止固定,取材。
请注意,临床中常用的是手术和尸检。实验动物取材,往往也是非固定的,因此在熟悉固定后人体或动物组织间的位置、关系后,成竹于胸,是很重要的。
采用锯切方法制作断面标本是研究器官的位置、器官与器官之间或局部与整体之间位置关系的有效方法之一。
血管灌注是将一些带有色料的填充剂灌注到血管内,通过解剖法,显示血管位置、行径和分支特点。
淋巴管较为细小,淋巴液无色透明,用一般解剖方法不易观察,所以通常多先注入有色的注射剂,然后再进行解剖观察。
二、用大体解剖学方法研究中医的现状
教材主要涉及:
第一段,介绍了中医最早的解剖纪录,这有力地推动了中医理论和临床的发展。
教材以下谈到: