文档介绍：山东农业大学
硕士学位论文
杨树内生细菌的分离、多样性分析及解淀粉芽孢杆菌PEBA20的
抑菌活性研究
姓名:胥丽娜
申请学位级别:硕士
专业:森林保护
指导教师:刘振宇
20090612
中文摘要.%、.%;对杨树水泡溃疡该菌也有较好抑菌作用,抑制率分别有关杨树水泡溃疡病的生物防治研究,国内外报道较少。作为一类新型的生防因子,植物内生细菌是定植在健康植物的各种组织和器官中,与植物之间形成互惠共存、相互制约的一类微生物。从杨树体内分离筛选有益细菌并应用于杨树病害的生物防治实践中将具有重要的现实意义。本研究旨在从杨树体中分离内生细菌并对其进行多样性分析;筛选出具有较高拮抗活性的内生细菌;并对内生细菌进行系统的分类学鉴定,测定了该内生细菌的发酵条件及抑菌活性;而对其代谢产物一蛋白质进行初步纯化。主要研究结果如下:辏、、月鲈路荩犹┌彩谐乔∪多年生的三倍体毛白杨枝干共分离到昴谏妇⒔惺夷谄桨遛抗筛选测定,获得株内生细菌对杨树水泡溃疡病病菌有较好的拮抗活性。通过鲈路莸姆掷胂妇⑾盅钍魈迥诤写罅康哪谏妇嘌性较丰富。采用甒治銎涠嘌裕嘌灾甘、丰度⒕榷,发现在不同分离时间的杨树枝条中内生细菌的种类、数量和多样性指数明显不同。ü嘌宰础⑷旧ǚ从Α⑸砩卣鞣治龊序列分析等方法对进行鉴定。结果表明,该菌为解淀粉芽孢杆菌。对峙培养发现对杨树水泡溃疡病病菌产生较宽的抑菌圈,表现较好的抑菌作用。抑菌谱测定结果表明,菌具有广谱抑菌活性,对杨腐烂病菌、茄子绵疫病菌、杨树炭疽病菌、合欢枯萎病菌等种病原真菌均有较好的抑制作用。菌株的活体和发酵滤液均表现广泛的拮抗谱,对杨树腐烂病菌抑菌效果最好,抑制率分别为:为:.%、.ァU馑得鱌匝钍鞑『Φ姆乐斡薪虾玫男Ч杨树水泡型溃疡病是由葡萄座腔菌秩疽起的重大枝干病害,该病普遍发生,危害严重,防治困难,严重影响着杨树的经济效益及生态效益。因而,寻求对杨树病害合理有效的防治措施已势在必行。生物防治具有安全而又环境友好的特点,越来越受到人们的关注,并展现出重大的发展潜力。山东农业大学硕,宦畚。
该菌株也表现出良好的抗细菌活性,对核桃黑斑病菌、烟草青枯病菌、马的抑菌活性测定。测定不同培养条件的发酵液对杨树水泡溃疡病菌的抑菌甈⒔团嘌竽芄徊咕鞍祝煌嘌跫碌牡鞍粗提液对杨树水泡溃疡病病菌有着较好的拮抗效果。菌发酵液的蛋白组分和%饱和度的硫酸铵盐析粗蛋白,,发现菌发酵后的蛋白质中含有阳离子蛋白质,;,形成明显的蛋白质吸收峰,各峰相对独立,峰形较尖锐,且没有拖尾。菌的初步分离。为进一步分离纯化奠关键词:杨树水泡溃疡病;内生细菌;分离;解淀粉芽孢杆菌;抑菌活性铃薯环腐病菌、巨大芽孢杆菌等细菌的抑菌圈均在以上。狙芯砍醪教教至瞬煌嘌跫碌姆⒔鸵憾匝钍魉堇Q癫【效果,得出在培养基,培养腜姆⒔鸵海匝钍魉泡溃疡病菌的抑菌效果最佳。通过二次正交设计优化发酵条件,计算得到该菌最适宜发酵条件为:.妫瑀琾ㄆ,定基础。杨树内生细菌的分离、多样性分析及解淀粉芽孢杆菌的抑菌活性研究。
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第一章文献综述以来,国内外学者在植物内生细菌的研究方面取得了丰硕成果。国外,来,人们对植物内生细菌的有益功能及其在农业生产上的应用潜力产生了浓厚的兴趣,@坝铩霸凇禾参由于各研究者的观点不同,关于内生菌的定义,至今尚无定论。年为将生活在植物组织内的微生物与那些生长在植物表面的表生菌相区别,首先提出了内生菌母拍郭良栋等,将内生菌定义为生活在地上部分、活的植物组织内不引起明显病害症状的微生物婢。直到年龋第一次提出了“植