文档介绍：安徽农业大学
硕士学位论文
茶树花特异表达启动子-花粉壁蛋白基因启动子表达研究
姓名:陈聪
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:江昌俊
20090601
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摘要组织特异性启动子常常具有特异性调控元件,这些元件与反式作用因子的互作使基因只在特定的组织和器官以及特定的生长发育阶段才进行表达。随着植物转基因技术的广泛应用,快速分离和鉴定植物体内各种特异启动子已经成为植物基因工程研究的热点和难点。茶树从花芽形成到种子成熟,共经过约一年半左右的时间,从而消耗了大量的养分。因此,控制茶树的生殖生长、促进营养生长是提高茶树产量在茶树花粉连续发育的过程中,始终都存在调控不同特异基因表达的启动子,本研究,以茶树龙井鲜叶为材料,利用翱寺〖际趸竦貌枋鰿舳悠启动子表达的特异性在抑制茶树的生殖生长、促进营养生长及创造雄性不育枋鰿舳诱婧吮泶镌靥宓墓菇根据胁枋鱌的序列锹己牛篍树启动子序列锹己牛篍杓埔铮τ肞技术从茶树中克隆出启动子片段,构建了真核表达载体瓹晒Φ亟ǜ盟1达载体导入根癌农杆菌,从而获得含有茶树启动子的工程菌。驱动傅谋泶铮⑶以诨ǚ鄣谋泶镉泻芮康奶匾煨浴枋鰿舳游榷ㄒ糯逑档慕利用农杆菌介导的叶盘转化法,将构建的茶树启动子真核表达载体成功转入受体植物细胞内并整合到烟草染色体中,这种转化细胞经过诱导分化,再生成关键词:启动子花粉壁蛋白特异表达茶树和品质的关键。段,并将其连接到真核表达载体上,利用农杆菌介导法将其转化到各受体植株的不同组织和器官,通过对与茶树启动子融合在一起的ǜ婊虻活性检测,从而分析该启动子在植物各组织和器官的表达活性,并以期利用茶树等方面提供研究基础。通过研究取得以下结果:安枋鰿舳颖泶锘钚缘牟舛通过农杆菌介导的瞬时表达,对茶树埔吨、丝瓜、一串红、木槿、油菜中根、茎、叶、花瓣、花药、花柱和种子等部位进行化学组织染色并对油菜在叶、根、茎、花瓣、花药等部位进行ü舛考觳猓峁砻鳎枋鰿舳幼阋为转基因烟草。以茶树启动子内部序列设计引物,转基因烟草芽叶中提取的总D0褰蠵检测。结果表明,用茶树片段构建的表达载体转化烟草,成功获得了一定数目的转基因植株。
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帆沙夕年护多月/乡日时间:沙矽年西月形日巨戛兰,隘毖独创性声明关于论文使用授权的说明年翴C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。第一导师签名:时间:
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南鬃凼真核启动子的一般特点的相互协调作用。其中启动子是转录水平调控最重要的顺式作用元件。因此启动子的I鲜龊诵钠舳釉<毡榇嬖谟谡婧说鞍妆嗦盒、转录因子侗鹞坏有的启动子可能包含以上全部元件,有的可能只包含其中的一部分元件,甚至有的一嬖诘那榭鱿乱廊痪哂基因转录是遗传信息传递和表达的枢纽,并受多种顺式作用元件和反式作用因子分析对整个基因组功能的诠释具有重要意义。启动子是基因的一个组成部分,它就像“开关”,决定基因的活动。启动子是转录调控的中心,它指导全酶与模板正确结合,并且促使酆厦柑匾煨缘仄鹗脊δ芑虻淖B迹送馄舳踊咕龆ㄗB嫉男屎方向以及与之结合的酆厦咐嘈汀S朐俗B枷啾龋婧俗B汲诵枰猂聚合酶外,还需要能够结合到启动子的顺式作用位点并与酆厦敢黄鹱槌筛春咸宓反式作用因子。在真核生物中一般将启动子从结构上分成两大区域,即核心启动子区域,和上游启动子元件【俊O旅娼饕4诱饬礁龇矫娼樯芷舳釉诮峁购凸δ芊矫娴研究进展。.耍琤启动子核心启动子侵改芄恢傅糝聚合酶起始转录的最小蛄校位于转录起始位点附近由鲎笥液塑账崴槌傻墓δ芮颉2斡隦聚合酶起始转录的所有转录因子作用的最终目标就是核心启动子,因为转录的精确起始需要将转录因子和酆厦窱技胶诵钠舳忧纬汕捌鹗几春咸澹婧笥蒖聚合酶执行转录的起始功能【俊K淙蛔畛跞衔:诵钠舳有蛄惺潜J氐模窍衷谌捶现它们在结构和功能上存在很大差异,不过这种核心启动子之间的差异有助于基因的表达调控。蛋白编码基因核心启动子元件包括:盒、上游启动子元件⑵鹗甲⑾掠纹舳釉<﨑以及新发现的位于浇氖蛟<编码蛋白基因的核心启动子主要包括以下五个元件:起始子,、珺⑾掠纹舳釉<珼约靶路⑾值奈挥贒附近的十基序元件,。这些元件参