文档介绍：1
◎学位论文中国肆耋斜学坼宪院中国·北京指导教师姓名指导小组成员论文答辩日期谢丽华卓仁英研究员田朝光研究员刘明英助理研究员生物化学与分子生物学林木抗逆功能基因组学学位论文作者申请学位级别专业名称研究方向硕士月2
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痩lllll/forthe:Molecular篨LihuaSupervisorProfessorRenyingAssociateChaoguangAppliedforandBiologyDefenceDegree-Conferring-Institution
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谢诵辞学位论文作者签名:谭葫牟独创性、声明学位论文版权使用授权书砂,月仞年‘月偈日日期:‘月馏日果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定,中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可以将学位论文的全部或部分内容编入学位论文作者签名:学位论文作者毕业联系方式工作单位:中国林业科学研究院亚热带林业研究所本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成的说明并表示谢意。有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签名:**********电子邮件:./通讯地址、邮编:浙江省富阳市大桥路号
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摘要入序列进行了测序和分析,)1性,为了挖掘其耐盐相关基因,探索其耐盐的分子机制,本研究在对其进行全基因组测序的基础上,利用大肠杆菌表达系统构建盐胁迫后曲霉突变体的文库,并进行耐盐基因的筛选,对筛选得到的高耐盐克隆进行了测序、生物信息学分析及初步的耐盐性鉴定。本研究为阐明曲霉突变体的耐盐机制、挖掘耐盐相关基因及林木耐盐转基因育种提供物质基础和理论依据。Solaxa289,有1kbcontigs3131的个,HA170gLNaClRNAcDNA48106pfumL905001500bp750。对随机挑选的龅タ寺〗胁庑颍竦昧条有效序列,利用的进行比对结果表明条序列有相应的同源序列和相关注释信息,它们分别与信号转导、渗透物合成、转录调控相关。提取文库的混合质粒缂ぷ;。通过点板试1NaCl5的转基因大肠杆菌生长情况均好于仅转化空载的大肠杆菌,可以初步确定外源基因提高5些基因与曲霉耐盐突变体的耐盐性密切相关。MglaucusmolL1
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另外选择了其中两个耐盐新基因,将其插入片段构建到改造过的植物超表达载体pBll21G150的培养基后,野生型拟南芥几乎全部萎蔫,而转基因拟南芥只有部分萎蔫。胁迫前后耐盐生理指标分析表明:胁迫条件下转基因拟南芥的钚浴⒁堵趟睾烤灾哂诙哉眨鳰含量低于对照,这些结果进一步说明,.。关键词:盐胁迫,文库,基因工程,穿梭载体,耐盐基因
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(NCBI)nonredundantprotein(Nr)databaseNCBIunigenes82(82)hadCansaltemthetoleranceSMARTsequence(Nt)databaseThetranscriptionMAhalotoleranceAspergillusglaucuswasthesurfacerange0-icengineeringThesequencedshotgunapproachThedraft31contigskilobaseordered甌totalall琲estimatedsizes,ordingcontructionprotoc01TotalRNAextractedstressTheEcoliapproximately48106唬甇hundred籺resultsfragmentsabout500-1500bpTheannotateddepositeddiversedatabasesincludingforBiotechnology猺indicatedamongsignificantmatchesdatabaseThe,synthesistransportregulationEBL2161pfumLTotaltransformantsplate瑃newg-LsequencesIIIa
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