文档介绍：硕士研究生:王伟旗指导教师:侯文胜研究员申请学位类别:农学硕士业:作物遗传育种研究方向:大豆基因工程培养单位:作物科学研究所研究生院提交日期:年甅专
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研究生虢王件瑜帆卅年∥月谘同导师签名:汉ゲ世彩奔洌痕谀旯辉旅王伟磁关于论文使用授权的声明沙。/年步月∥同本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文作者签名:时间:的研究他人已构的学己在论
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摘要椒ǚ治鏊大豆是世界上重要的粮食作物,又是我国主要的油料作物。大豆属于中度耐盐植物,受盐渍条件影响显著,在盐渍条件下产量下降明显。我国是盐碱化土地分布广泛的国家之一,且由于灌溉不当、植被破坏和海水入侵等因素,致使土地盐渍化的面积每年还在不断增加。因此,培育耐盐品种显得尤为迫切。抑制差减杂交技术是一个研究基因差异表达的有效方法,而且在多数植物中都有成功应用的例子。但是,在筛选文库时会得到大量的蛄校竦玫挠行Щ蚴拷仙伲筛选的效率较低。尽管与耐盐机理相关的信息比较丰富,但是耐盐机理的基础理论研究还不够深入。为了更好的理解大豆盐胁迫反应的分子机理和克隆一些大豆中重要的耐盐基因。本研究利用大豆耐盐品种文丰藕脱蚊舾衅分諹,分别构建了耐盐大豆品种根系盐诱导表达的抑制差减文库和盐敏感大豆品种根系盐诱导表达的抑制差减文库。利用文库和的二次铮僖淮蔚囊种撇罴踉咏唬菇艘种撇罴跷目釹T三个文库中分别随机挑取了阳性克隆子,经过测序共获得高质量的蛄觯个来自,隼醋許个来自。并提交的菘庵校竦眯蛄经过序列比对分析,挑选了个可能与耐盐性相关的基因。利用—在不同大豆品种盐处理前后的差异表达情况。结果表明,这些基因在文丰險盐处理前后中的表达存在差异。对文库和中相同和相似的蛄薪辛薉杂交检测。杂交的结果表明,文库确实可以将和中相似的蛄刑蕹簟6晕目釹蚐谢竦玫腅序列进行了基因的功能注释和δ芊掷喾治觥=峁っ鳎目釹梢越恍┯肷し⒂防御机制相关的基因剔除掉。因此,文库确实使耐盐相关的基因得到了富集,而且提高了筛选的效率。从与大豆耐盐性高度相关的蛄兄腥范ú⒀≡窳个候选基因。通过与中的菘饨斜榷苑治觯げ夂涂寺×肆礁龌颉I镄畔⒀Х治龇⑾郑欠直鹩肓蜓趸蛋白和耐钠、锂离子基因同源性很高,分别被命名为虶仪叭搜芯糠⑾郑这两类基因与提高植物的耐盐性相关。构建了蚋底;⒎匆搴腿笔У谋泶镌体,利用大豆根系转化系统研究了这个基因与耐盐性的关系。试验结果表明,虻墓表达在一定程度上提高了大豆转基因发状根和大豆复合体植株的耐盐性。关键词:大豆,抑制差减杂交,盐胁迫,号为.。
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第二章采用再次抑制差减杂交的方法,筛选与克隆大豆耐盐基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯.材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..躌的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯