文档介绍：【菌种】齿垢
【试剂】生理盐水、革兰染液
【其他材料】酒精灯、接种环、玻片、牙签、吸水纸、
显微镜等
【方法】1、细菌涂片标本的制片
2、革兰染液染色
3、油镜下观察结果
革兰染色法
由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。
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精选课件
器具：接种环（上）和接种针（下）
柄约22cm
2—5mm
绝缘柄

5—8cm
安装环(针)的螺口(约8mm)
细菌涂片的制备
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精选课件
操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）
Aseptic area
10-20cm
外焰
焰芯
内焰
3
精选课件
菌液采取法
细菌涂片的制备
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精选课件
一、细菌涂片的制备
一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片干燥固定
【操作步骤】
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精选课件
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘得更牢固；
可改变菌体对染料的通透性；
加热固定可杀死细菌，比较安全。
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精选课件
结晶紫 1’ 碘液 1’ 95% 乙醇 30” 复红 1’

冲洗滤纸干燥油镜观察
冲洗
冲洗
冲洗
二、革兰染液染色
初染
媒染
脱色
复染
【操作步骤】
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精选课件
紫色（G＋）
革兰氏染色步骤示意图
革兰氏染色
甲菌
乙
菌
初染
结晶紫
媒染
碘液
脱色
乙醇
复染
稀释复红
紫色（G＋）
红色（G-）
革兰氏染色步骤示意图
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精选课件
【结果】
细菌被染成紫色者，称为革兰阳性菌；
而细菌染成红色者，称为革兰阴性菌；
阳性菌——紫色
阴性菌——红色
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精选课件
【意义】
鉴别细菌，用本法染色可将细菌分成两大类。
了解致病性
指导选择用药
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精选课件