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文档介绍

文档介绍:第15章 免疫细胞功能检测技术
医大一院检验科
1
精选课件
本章内容
吞噬细胞功能检测技术
免疫细胞功能检测的临床应用
免疫细胞功能检测技术
淋巴细胞的功能检测
2
精选课件
免疫细胞
淋巴 细胞群
识别特异性抗原 ,被激活显示出特异性应答
吞噬 细胞
T细胞
B细胞
NK细胞
中性粒细胞
巨噬 细胞
树突状细胞
捕获抗原,处理抗原,提呈给淋巴细胞或表现其他免疫功能
3
精选课件
一、T细胞功能的检测
二、 B细胞功能检测
三、 NK细胞活性测定
第一节
淋巴细胞的
功能检测
淋巴细胞
T细胞
NK和
K细胞
B细胞
细胞免疫功能
非特异性免疫作用
体液免疫功能
4
精选课件
淋巴细胞功能测定
间接了解淋巴细胞对抗原、半抗原或有丝分裂原的应答反应
体内实验
主要包括淋巴细胞对抗原或有丝分裂原刺激后的增殖反应、细胞毒性试验及淋巴细胞分泌产物的测定
体外实验
5
精选课件
4
T细胞增殖试验
1
2
3
T细胞介导的细胞毒试验
T细胞分泌功能测定
体内试验
一、T细胞功能的检测
6
精选课件
(一)T细胞增殖试验
DNA合成
刺激
分化
有丝分裂原/抗原
淋巴细胞
淋巴
母细胞
细胞变大
细胞浆扩大
空泡
核仁明显
核染色质疏松
空泡
7
精选课件
未转化和转化淋巴细胞的形态特征
转化的淋巴细胞
未转化的淋巴细胞
淋巴母细胞 过渡型
细胞大小(直径μm)
12~20
12~16
6~8
核大小、染色质
增大、疏松
增大、疏松
不增大、密集
核仁
清晰、1~4个
有或无

有丝分裂
有或无


胞质、着色
增多、嗜碱
增多、嗜碱
极少、天青色
浆内空泡
有或无
有或无

伪足
有或无
有或无

8
精选课件
检测方法
(1)形态学检查法
(2)3H-TdR掺入法
优点:简便易行
缺点:重复性和准确性差
刺激物
PHA
ConA
优点:敏感性高,客观性强 重复性好
缺点:设备条件 放射性核素污染
淋巴细胞(4-6天) 母细胞化
淋巴细胞DNA合成期 3HTdR掺入 测定细胞内的3H
(3)MTT比色法
PHA刺激管cpm均值
对照管cpm均值
SI=
优点:操作简便,无放射性污染
缺点:敏感性低于3H-TdR掺入法
培养终止前加入MTT 测定溶解的甲臜
9
精选课件
(二) T细胞分泌功能测
体外培养的T细胞经各种丝裂原或抗原刺激后,分泌各种细胞因子,可借助免疫学、细胞生物学及分子生物学技术分别检测细胞因子含量、生物学活性或基因表达水平,以反映T细胞功能。
10
精选课件